Hujayra va gen ingenerligi

Internet saytlari
1.http://www.microbiology.ru/cmac/
2. http://www.study/online/ks/ua/
3. http://journal.issep.rssi.ru
4.http://novsu-micr.narod.ru/
5.http://www.obolensk.org/
6.http://www.chemport.ru/microbiology.shtml
7.www.sibpatent.ru,
8. www.kubnet.ru.
9. www.pereplet.ru.
6-mavzu: Gibridomalar olish texnologiyasi
Gibridomalar olish texnologiyasi
Gibridoma qo’sh hujayra – biron-bir foydali birikmaning sintezlanishini nasldan-naslga o’tkazadigan normal hujayra bilan amalda cheksiz o’sish (ko’payish) xususiyatiga ega bo’lgan rak, shish hujayralarning qo’shilishidan hosil bo’lgan duragay hujayra.
DNK gibridlarini olishning in vitro usullari

1. 
   Konnetorli metod
   

1972-yilda P.Berg va uning hamkasblari birinchi bo’lib gibrid molekulasini in vitrosharoitda olingan, u SV40 virus DNK si va dvgal fag DNK sidan tashkil topgan. Bunda konnektorli metod qo’llanilgan. Bu metodning prinsiplari quyidagicha: in vitro rekombinatsiyalayotgan DNK fragmentining 3^I-oxiriga dezoksinukleotidiltransferaza yordamida bir zanjirli aligo (cJA) segmentining ma’lum uzunlikdagisini biriktiradi.
Boshqa fragmentning oxirgi uchiga – oligo (dT) segmentlari shunday uzunlikda birikadi. Shu usul bilan fragmentlarning qo’shish natijasida halqali strukturalar paydo bo’ladi, ya’ni oligo (dA) va oligo (dT)ketma-ketlik orasidagi vodorod bog’lar hisobiga halqa struktura hosil bo’ladi. Bir zanjirli breshi DNK ning gibridli molekulasi zastraivayut DNK – polimeraza 1 E.coli va zanjirni ligazali reaksiya bilan kovalent tikiladi.
Konnektorli metod bilan dastlabki DNK ni (mexanik, fermentativ) parchalab, in vitro DNK fragmentlarini rekombinatsiyalash mumkin. Buning uchun sintetik komplementar oligo (dA)-oligo (dT) yoki oligo (dY)- oligo (dC) –oxirli fragmentlar qo’llaniladi. Bunda yetarli uzunlikda o’zaro komplementar bir zanjirli oxirli, yuqori effect bilan gibrid molekulasini hosil qilsh mumkin. Shuning uchun DNK ni klonlashda-matrisali RNK nusxasi ya’ni ma’lum miqdori konnektorli metod uchun yetarlidir.
Shuningdek bu metodda ham kamchiliklar mavjud. DNK ni gibrid molekulasidan fragmentlarni ajratish qiyinroqdir. Qator holarlarda oligo (1A=dT)-ketma-ketlikda DNK fragmenti denaturatsiyasi uchun tanlab sharoit yaratiladi va hosil bo’lgan bir zanjirli uchastkani endonuleaza S1 bilan fermentative parchalanadi. DNK fragmentining in vitro rekombinatsiyasida generirovannix restriktaza PstI, sintetik oligo-(dY)-oligo(dC)-oxirli uchastkasi bu restriktazani tanib, restriktaza qaytariladi. Ushbu fragment qo’shimcha (dY. dC) oxirli segmentlarga ega.

2.