Bioorganik kimyo

          g)
                                               
                                                              
         eykozapeptidni  parchalash  uchun  qaysi  bir  fermentli  va  
kimyoviy usullarni qo’llagan bo’lar edingiz?  
 d) Edman usuli bo’yicha aminokislota ketma-ketligini aniqlashda bir 
aminokislotani parchalanish jarayonini mexanizmini keltiring. Bunda 
     peptid,  2-anilino-5-tiazolinon,     -aminokislota  va  3-fenil-2-
tiogidantoinlarning hosil bo’lishi albatta hisobga olinsin. 
           f)
                                                      
                                                           
     dekapeptidni kimyoviy, fermentli va mass-spetrometrik usullarda 
sekin-asta parchalab aminokislota ketma-ketligi qanday aniqlanishini 
tushuntirib bering. 
         
          Oqsil  va  peptidlarning    aminoksilota  tarkibini  aniqlash  uchun 
tekshirilayotgan  manba  5.7  n.  xlorid  kislotada  gidroliz  qilinadi  va 
gidrolizatdagi  barcha  aminokislotalarni  miqdori  aniqlanadi.  Namuna 
gidrolizi vakuumda kavsharlangan ampulada 
     24 soat davomida 
amalga  oshiriladi.  Bunda  triptofan  to’liq;  serin,  treonin,  ttsistin  va 
ttsistein  qisman  parchalanadilar,  glutamin  va  asparagin    esa  tegishli  
asparagin  va  glutamin  kislotalargacha  to’liq  parchalanadi.  Shu  bilan 
birga  tarmoqlangan  yon  zanjirli  aminokislotalardan(
             ) 
hosil  bo’lgan  peptid  bog’lari  fazoviy  to’sqinliklar  natijasida  qisman 
gidrolizlanadi.  Ayniqsa 
                                             
bog’lari  barqarordir.Oqsilni  aminokislota  tarkibini  juda  to’g’ri 
aniqlash  uchun  24,  48,  72  va  96  soat  davomida  parallel  ravishda 
gidroliz amalga oshiriladi va barcha namunalar tekshiriladi. Oqsildagi 
triptofan miqdorini aniqlash uchun gidrolizda xlorid kislota o’rniga 4 
n. metansulfokislota olinadi. Triptofanni spektrofotometrik yoki rangli 
reaksiyalar yordamida aniqlash mumkin. Odatda oqsilni aminokislota 

---

 
57 
tarkibini  aniqlashda  glutamin  va  glutamin  kislota,  asparagin  va 
asparagin 
kislotani 
umumiy 
miqdori 
aniqlanib, 
ularni 
differentsiatsiyasi  birlamchi  tuzilishni  aniqlash  jarayonida  amalga 
oshiriladi.  Oqsil  gidrolizatidagi  aminokislotalarni  miqdoriy  aniqlash 
aminokislota  analizatori  qurilmasi    orqali  amalga  oshiriladi. 
Analizator  1958  yilda 
          va              tomonidan  yaratilgan. 
Aminokislotalar  aralashmasi  sulfirlangan  polistirol  smolasi  bilan 
to’ldirilgan kolonkada ionalmashinish xromatografiyasi orqali amalga 
oshiriladi.  Kolonka  bufer  eritmalari  bilan  asta-sekin  ularni 
    va 
konsentrasiyasini oshirilib  yuviladi. Har bir aminokislotani ushlanish 
vaqti  aniqlangan  bo’lib,  uni  ionlanish  darajasiga  bog’liqdir. 
Kolonkadan chiqayotgan elyuat ningidrin eritmasi bilan aralashtiriladi 
va  maxsus  bo’lmachada        gacha  qizdiriladi.  Aminokislota 
ningidrin  bilan  ta’sirlashib,  ammiak,  karbonat  angidrid  va  aldegid 
hosil  qiladi.  Hosil  bo’lgan  ammiak  ningidrinni  boshqa  molekulasi 
bilan  ta’sirlashib,  570  nm  da  yutilish  maksimumiga  ega  binafsha 
rangli hosila hosil qiladi. Prolin ningidrin bilan ta’sirlashib, 440 nm da 
maksimumga  ega  sariq  rangli  mahsulot  hosil  qiladi.  Reaksiya 
natijasida  hosil  bo’layotgan  mahsulotlar  intensivligi  tekshirilayotgan 
gidrolizatdagi  aminokislotalar  miqdoriga  proportsional  bo’lib, 
spektrofotometr  yordamida  aniqlanadi.  Zamonaviy  aminokislota 
analizatorlarida    1  nanomol  aminokislota  ishonchli  aniqlanadi, 
tekshirish  vaqti  1.5-2  soatni  tashkil  etib,  barcha  jarayon 
avtomatlashtirilgan.  Ba’zi  analizatorlarda  sezgirlikni  oshirish  uchun 
aminokislotalar  bilan  ta’sirlashayotganda  fluorestsirlovchi  birikmalar 
hosil  qiluvchi    fluoreskamin  yoki  o-ftal  angidrid  qo’llanadi.  Bunday 
holatlarda  maxsus  detektor  qo’llab  10-50  pikamol  aminokislotani 
aniqlash mumkin.