Учебно-методический комплекс ферганский филиал узбекского государственного университета физической культуры и спорта

в моче колориметрическим методом Брауна.
Колориметрический метод определения креатинина в моче основан на реакции Яффе, заключающейся в развитии интенсивной оранжевой окраски при смешивании растворов креатинина со щелочным пикратом. Креатин определяется в виде креатинина. Для перевода креатина в креатинин производится нагревание его при высокой температуре в присутствии соляной кислоты.
Оборудование: фотоэлектрокалориметр (ФЭК), водяная баня, штатив для пробирок, пробирки, пипетки.
Реактивы: 0,1 Н раствор соляной кислоты, насыщенный раствор пикриновой кислоты, 10%-раствор едкого натрия, дистиллированная вода.
Ход работы:
Берут три пробирки: первая для определения креатинина, вторая для определения креатина, третья – контрольная.
Во все три пробирки вносят по 0,2 мл соляной кислоты. В пробирки № 1 и № 2 наливают по 0,2 мл мочи, разведенной в пять раз. Пробирку № 2 кипятят в водяной бане 3 минуты, затем охлаждают. Во все три пробирки добавляют воды: № 1 и № 2 по 2 мл, а в № 3 – 2,2 мл затем приливают по 0,6 мл пикриновой кислоты и по 1 мл едкого натрия. Оставляют стоять 8-10 минут. Во все три пробирки добавляют по 5 мл воды. После каждого добавления реактивов содержимое пробирок перемешивают путем встряхивания.
Определение оптической плотности исследуемых растворов производят на фотоэлектрокалориметре при длине волн 500-540 нм (с зеленым светофильтром). Колориметрируют против контрольного раствора (пробирка № 3).
Расчет количества креатинина производится по формуле:

где А– количество мг креатинина, выделившегося с мочой за сутки; а – количество креатинина в 1 мл мочи, найденное по калибровочной кривой, в – разведение мочи, с – количество суточной мочи. Построение калибровочной кривой производится по основному стандартному раствору креатина. Определяют оптическую плотность раствора в фотоэлетрокалориметре.
Во второй пробирке определяют сумму креатинина и креатина, переведенного в креатинин. Количество креатина вычисляется по разнице между показателем первой и второй пробирки. Для взрослых, практически здоровых мужчин, выделение креатинина в суточной моче равняется 1-2 г, креатин – не обнаруживается.

6. 
   Преподаватель проверяет записи и выводы студентов по проведенным опытам и дает домашнее задание – 10 мин.
   
7. 
   Студенты убирают и приводят в порядок рабочие столы – 5 мин.
   

5.