Учебно-методический комплекс ферганский филиал узбекского государственного университета физической культуры и спорта

Получение белковых и безбелковых экстрактов.

Прежде чем приступить к анализу мышечной ткани готовятся настои: водный, солевой и безбелковый. Белки мышечной плазмы определяются в водном экстракте, структурные белки – в солевом экстракте, а экстрактивные вещества мышцы в безбелковом экстракте.
Оборудование: фарфоровая ступка, стеклянный песок, водяная баня, бумажные фильтры, стеклянные воронки, химические стаканы, колбы ан 50 и 100 мл, марли, пипетки, пробирки, универсальный бумажный индикатор.
Реактивы: 8%-раствор хлористого аммония или 5%-раствор хлористого калия, 10%-раствор NaOH, 2%-раствор сернокислой меди, раствор сульфасалициловой кислоты, 5%-раствор серной кислоты,насыщенный раствор пикриновой кислоты, 3%-раствор молибденовокислого аммония, концентрированный раствор азотной кислоты, 1%-раствор азотнокислого серебра, 1%-раствор хлорис-того бария, 10%-раствор уксусной кислоты.

1. 
   Водный экстракт – в фарфоровую ступку помещают 10 г мыщц, растирают ткань стеклянным пестиком, переносят в стаканчик, заливают трехкратным количеством дистиллированной воды и настаивают 15 мин, периодически настой перемешивают. Затем жидкость фильтруют в чистую колбу через 3 слоя марли. Остаток ткани в стаканчике снова заливают 30 мл воды и вновь отстаивают 15 мин фильтруют в колбочку.
   
2. 
   Солевой экстракт – оставшуюся в стаканчике мышечную массу переносят в фарфоровую ступку и заливают 30 мл 8% хлористого аммония или 5% раствором хлористого калия и оставляют на 60 мин периодически помешивая.
   

Настой фильтруют в чистую колбу через бумажный фильтр.

3. 
   Безбелковый фильтрат – 15 мл водного экстракта подкисляют 5 каплями 10% раствора уксусной кислоты и кипятят. Белки выпадают в осадок. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в чистую колбу. Все эти экстракты приготавливаются заранее.
   

2.