Трофимова Светлана Алексеевна, доцент кафедры ботаники и физиологии растений института биологии, экологии и агротехнологий ПетрГУ, кандидат биологических наук рабочая программа дисциплины

3.Правила работы в бактериологической лаборатории

1. 
   Работать в шапочке и застегнутом халате.
   
2. 
   Не курить и не принимать пищу.
   
3. 
   Пользоваться своим рабочим местом и прикрепленным к нему оборудованием.
   
4. 
   Соблюдать чистоту и опрятность в работе.
   
5. 
   Инструменты, предметные стекла после использования поместить в дезинфицирующий раствор или простерилизовать в пламени.
   
6. 
   Все используемые материалы обезвредить паром под давлением.
   
7. 
   Места на лабораторных столах или на полу, случайно облитые или обрызганные заразным материалом, тотчас залить раствором хлорамина (до 1 ч) и поставить в известность преподавателя.
   
8. 
   После завершения работы привести в порядок рабочее место, культуры и другие материалы сдать дежурному, руки обработать дезинфицирующим раствором и вымыть с мылом. Тетрадь с протоколом представить для подписи преподавателю.
   

4.Самостоятельная работа
1.Методы приготовления мазков

• 
  Приготовить препарат из культуры, выросшей на агаризованной питательной среде: на обезжиренное стекло нанести дистиллированную воду; прокаленной и охлажденной петлей взять культуру бактерий и внести в каплю воды на стекле. Материал распределить равномерно круговыми движениями, а петлю прокалить в пламени.
  
• 
  Приготовить препарат из культуры, выросшей на жидкой питательной среде: на обезжиренное стекло нанести пипеткой каплю бульонной культуры бактерий. Материал распределить равномерно круговыми движениями, а петлю прокалить в пламени. Пипетку поместить в дезинфицирующий раствор.
  
• 
  Высушить мазок: Тонкие мазки высушить на воздухе при комнатной температуре. Толстые мазки высушивают в термостате или над пламенем спиртовки. Высушенные мазки фиксируют с целью: А. закрепить бактерии на стекле, чтоб они не были смыты в процессе окраски; Б. убить микроорганизмы, которые лучше, чем живые воспринимают красители и не представляют опасности.
  
• 
  Зафиксировать мазок в пламени спиртовки: предметное стекло взять за край мазком вверх и троекратно провести через наиболее горячую часть пламени, описывая круг диаметром 15-20 см. Фиксация этим способом продолжается 15-20 секунд.
  

2.Простая окраска препаратов

• 
  Анилиновые красители и их применение (разбор)
  
• 
  Механизм окраски бактерий (разбор)
  
• 
  Техника простого метода окраски: фиксированный препарат поместить мазком вверх на подставку, пипеткой нанести раствор красителя на мазок так, чтоб он весь был покрыт им. Краску на мазке выдержать 1-2 минуты (метиленовую синь – до 5 минут). После окраски краситель слить, препарат промыть водой и высушить фильтровальной бумагой. Окрашенные препараты промикроскопировать и зарисовать.
  

3.Негативная окраска зубного налёта по Бурри: негативный способ окраски позволяет исследовать микроорганизмы в неокрашенном виде. При этом способе окрашивается фон препарата тушью, а бактерии не воспринимают краситель. При микроскопировании таких препаратов на окрашенном темном фоне четко выделяются неокрашенные тела микробов. 

• 
  В каплю воды, помещенную на край предметного стекла, поместить фрагмент зубного налета, взятого стерильной петлёй у шейки зуба. Равномерно проэмульгировать его в капле, рядом с каплей воды нанести тушь; обе капли тщательно перемешать петлей и из этой смеси сделать ребром второго предметного стекла мазок.
  
• 
  Готовый препарат высушить на воздухе, промикроскопировать и зарисовать все выявленные формы микроорганизмов в составе зубного налета.
  

4.Знакомство с основными формами бактерий
А. шаровидные формы:

• 
  микрококки
  
• 
  диплококки
  
• 
  тетракокки
  
• 
  сарцины
  
• 
  стрептококки
  
• 
  стафилококки
  

Б. палочковидные формы:

• 
  бактерии
  
• 
  стрептобактерии
  
• 
  бациллы
  
• 
  стрептобациллы
  
• 
  клостридии
  

В. извитые формы:

• 
  вибрионы
  
• 
  спириллы
  
• 
  спирохеты
  
• 
  С. нитевидные формы
  
• 
  актиномицеты