для опухоль-адресующей терапии глиом
Дмитриева М.Д.
1,2
, Войтова А.А.
2
, Нуштаева А.А.
2
, Коваль О.А.
1,2
, Дымова М.А.
2
,
Кулигина Е.В.
2
1 Новосибирский государственный университет, Новосибирск, Россия
2 Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН,
Новосибирск, Россия
Одним из самых трудноизлечимых типов злокачественных новообразований
являются опухоли головного мозга, 81% которых составляют глиомы. Стандартные
методы лечения глиом обладают ограниченной эффективностью, увеличивающей
продолжительность жизни пациентов в среднем на один год. Низкая эффективность
применяемой терапии обусловлена, в основном, неспецифичностью применяемых
методов лечения. Одним из возможных путей решения данной проблемы является
таргетная терапия, основанная на применении препаратов, специфически воздей-
ствующих на конкретные типы опухолей, что позволяет повысить эффективность
лечения и минимизировать токсические эффекты в отношении здоровых тканей
организма. Использование в качестве моделей опухолей первичных культур клеток
глиом человека, которые максимально воспроизводят молекулярный профиль клеток
исходной опухоли, способствует развитию данного терапевтического подхода.
В ходе настоящей работы из биоптатов опухолей получены шесть первичных
культур клеток: культуры анапластической олигодендроглиомы и анапластической
астроцитомы, и четыре культуры клеток глиобластомы человека. Проведено сравнение
морфологии и характера роста клеток первичных культур и клеток иммортализованных
культур глиом человека T98G, U87 MG, U251 и U343. Показано, что клетки первичных
и иммортализованных культур значительно отличаются по размеру, морфологии
и скорости роста. Для характеризации клеток полученных первичных и иммортали-
зованных культур использовали следующие опухолевые маркеры: глиальный кислый
фибриллярный белок (GFAP), Ki-67, рецепторы CD44 и CD133. Методом иммуноци-
тохимии показано, что уровень GFAP достаточно высок в клетках всех исследованных
культур. Показано, что наибольший уровень Ki-67 наблюдался в клетках иммортализо-
ванных культур, обладающих эпителиальным фенотипом, в то время как в фибробла-
стоподобных клетках первичных культур этот маркер детектировался на низком
уровне. Уровень маркеров CD44 и CD133 определяли методом проточной цитометрии.
В клетках практически всех культур количество CD44-положительных клеток
находилось на высоком уровне, наибольшее количество было обнаружено в культуре
T98G и составило 96,9%. Количество CD133-положительных клеток детектировалось
на крайне низком уровне во всех исследуемых культурах. Уровень мРНК опухолевых
маркеров EGFR, CD44, p53 и Ki-67 определяли методом ОТ-ПЦР. Чувствительность
клеточных культур к онколитическому действию вируса осповакцины VV-GMCSV-Lact
оценивали с помощью МТТ-теста. Наибольшую чувствительность к онколитическому
действию вируса проявили клетки культуры AS2 (анапластическая астроцитома).
Работа выполняется при финансовой поддержке РНФ (проект № 19-44-02006).
Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
71
Do'stlaringiz bilan baham: |