Оптимизация cпособов подготовки препаратов бактериофагов
для длительного хранения
Ушакова Т.А., Морозова В.В., Козлова Ю.Н., Тикунов А.Ю., Тикунова Н.В.
Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новоси-
бирск, Россия
Для использования бактериофагов в терапии немаловажное значение имеет форма
используемого препарата и сохранение активности действующего вещества в
течение длительного времени. Исследование стабильности сухих препаратов бакте-
риофагов проводилось с использованием бактериофагов из Коллекции экстремо-
фильных микроорганизмов и типовых культур ИХБФМ СО РАН. В эксперименте
были использованы бактериофаги, специфичные к штаммам
proteus mirabilis, Klebsiella
spp
.
,
Staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis
, обладающие
различными морфотипами (
podoviridae, Siphoviridae
и
Myoviridae
).
Препараты подвергали высушиванию с использованием вакуумного концентратора
(Эппендорф, Германия), используя для стабилизации препаратов различные напол-
нители: сухое обезжиренное молоко, альбумин бычий сывороточный и поливинилпир-
ролидон. Хранение сухих препаратов проводили параллельно при 4°С в течение года
и при 37°C в течение 2 недель. Определяли жизнеспособность бактериофагов методом
титрования через 1 месяц, полгода и год хранения препаратов при 4°С и через сутки,
неделю и две недели хранения при 37°C.
Показано, что бактериофаги различных морфотипов по-разному переносят высу-
шивание; так, фаги сем-ва
podoviridae
хорошо переносят cушку как в присутствии
наполнителей так и без них, фаги семейства
Myoviridae
хорошо сохраняют жизнеспособ-
ность после сушки в молоке или альбумине, а фаги
Siphoviridae
наименее стабильны
и сохраняются при высушивании только в присутствии молока в качестве напол-
нителя. Показано, что хранение высушенных препаратов при 4°C значительно эффек-
тивнее, чем при 37°C; при этом было выявлено, что подовирусы стабильно сохраняются
в течение 12 мес при 4 °C независимо от наполнителя. Представители семейств
Myoviridae
и
Siphoviridae
стабильно хранятся в течение 12 месяцев только в присутствии сухого
молока или альбумина. Таким образом, длительное хранение сухих препаратов бакте-
риофагов различных морфотипов возможно в присутствии наполнителей, аналогичных
сухому молоку или бычьему сывороточному альбумину. Высушенные с такими напол-
нителями препараты хранятся в течение года при 4 °C без видимой потери активности.
Работа выполнена при поддержке Фонда РФФИ, проект № 18-29-08015.
Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
220
Do'stlaringiz bilan baham: |