Сборник содержит материалы научной мультиконференции «Биотех- нология медицине будущего»

Невирусные иммуногены для индукции зародышевых предшественников 
широко-нейтрализующих антител против вируса иммунодефицита человека
Таранин А.В.
1
, Горчаков А.А.
1
, Баранов К.О.
1
, Наякшин А.М.
1
, Волкова О.Ю.
1
, Чикаев Н.А.
1
,
Мечетина Л.В.
1
, Гусельников С.В.
1
, Кулемзин С.В.
1
, Тиллиб С.В.
2
, Черникова Д.С.
1
, 
Беловежец Т.Н.
1
1
Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия 
2
Институт биологии гена РАН, Москва, Россия
Антитела против консервативных эпитопов вируса иммунодефицита человека 
(ВИЧ), получили название широко-нейтрализующих (bnAb) благодаря своей способ-
ности блокировать различные генетические варианты ВИЧ-1. Индукция bnAb в ходе 
профилактической вакцинации позволила бы обеспечить защитный иммунитет против 
ВИЧ-инфекции. Проблема в том, что в наивном В-клеточном репертуаре человека 
нет антител, способных связывать консервативные эпитопы ВИЧ с высокой аффин-
ностью. Наиболее эффективные bnAb появляются в результате длительного накоп-
ления мутаций в определенных зародышевых предшественниках. Эти немутированные 
предшественники (uca-bnAb) кодируются редкими комбинациями VH- и VL-генов и, 
что особенно важно, не взаимодействуют с вирусными белками. Таким образом, для 
генерации bnAb в ходе профилактической вакцинации необходимы, прежде всего, 
иммуногены, способные стимулировать uca-bnAb-экспрессирующие В-лимфоциты. 
Антитела класса VRC01 против CD4-связывающего сайта ВИЧ относятся к числу 
наиболее действенных и обеспечивают защиту от 90% генетических вариантов ВИЧ. 
В основе bnAb VRC01 лежит комбинация VH1-2 и VK3-11/3-20 доменов. Наивные 
В-клетки, экспрессирующие uca-VRC01, встречаются в периферической крови с час- 
тотой менее 0,001% и не стимулируются вирусными белками. С целью создания иммуно-
генов для селективной активации таких клеток мы сконструировали панель антиидио-
типических агентов (АИА), специфично распознающих идиотопы uca-VRC01 в виде 
моноклональных антител мыши, однодоменных антител верблюда и однодоменных 
антител ламы. Все полученные АИА обладали способностью активировать сенсорные 
В-клетки, несущие uca-VRC01 в составе В-клеточного рецептора. Цитометрический 
анализ показал, что популяция В-лимфоцитов, связывающих АИА, в периферической 
крови здоровых доноров составляет менее 0,01%. Эти В-клетки были выделены и ре- 
пертуары продуцируемых ими антител были определены с помощью высокопроиз-
водительного секвенирования или индивидуального клонирования генов иммуно-
глобулинов. Полученные результаты показали значительное обогащение выделенной 
популяции клеток В-лимфоцитами, экспрессирующими характерные для VRC01-
класса гены VH1-02, VK3-20 и VK3-11. Таким образом, АИА могут быть использованы 
для индукции предшественников bnAb VRC01. 
Работа поддержана грантами РФФИ № 16-04-00915 и 18-29-08051.

---

Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
217