С. А. Эгамбердиева молекуляр

Расм
 6
.4. Рестрикция 
сайтларини 
хариталаш. 
А. 
ДНК 
кўрсатилган ферментлар 
орқали бўлиниши 
натижасида олинган 
фрагментларнинг гель-
электрофорези натижалари. 
Тозаланган ДНК
Eco
RI 
ва 
Bam
HI рестриктазалари 
билан алоҳида, кейин эса 
аралашмаси билан 
гидролизланади, гель-
электрофорез ўтказилди ва 
маҳсулотлар бромид этидий 
билан бўялиб, 
визуаллаштирилди. 
Горизонтал чизиқлардан чап 
тарафдаги сонлар – асослар 
жуфтлигидаги фрагментлар 
узунлиги. 
Б. 
Электрофорез 
маълумотлари асосида 
тузилган рестрикцион 
харита. Сонлар – мос 
келувчи ферментлар таниш 
сайтлари орасидаги масофа. 
(Глик ва Пастернак бўйича)
 
ДНКга рестриктаза 
Ват
HI билан ишлов берилганда ҳосил 
бўладиган 950 н.ж. фрагмент 
EcoRI
икки маротабали гидролизида уч 
фрагментга парчаланади (250+300+400 - 950 н.ж.). Демак, икки 
Ват
HI
-
сайти
EcoR
I учун сайтлардан икки томонга 250 и 400 н.ж. 
масофада жойлашган
. Ват
HI 850 н.ж. узунликдаги 
EcoRI
-
фрагментни 250 ва 600 н.ж. узунликдаги фрагментларга парчалайди, 
EcoRl 
учун сайтлардан бири эса
Ват
HI учун сайтдан 250 н.ж. 
масофада жойлашган, демак, 600 н.ж. фрагментида ДНК дастлабки 
молекуласининг учларидан бири бўлиши керак. Биз кейин 
Ват
HI 
узунлиги 500 н.ж. бўлган 
Есо
RI-фрагментини ўлчамлари 100 ва 400 
н.ж. бўлган икки фрагментга парчалашини ва 
Eco
RI-сайтларидан 
бири 
BamHI
-caйтидан 400 н.ж. ажратилганлигини кўрамиз, демак, 
узунлиги 100 н.ж. бўлган фрагмент дастлабки молекуланинг бошқа 
учига эга бўлиши керак. 6
.4,Б 
расмдаги харита ҳар бир гидролизда 

---

51 
олинадиган фрагментлар ўлчамлари ва рестрикция сайтлари ҳолати 
ўртасидаги аниқ мувофиқликни кўрсатади.
Рестрикцияловчи эндонуклеазалар томонидан бўлинишнинг 
яна бир қўлланилиши мавжуд. ДНКнинг икки хил намуналарига 
айнан бир хил рестриктаза билан ёпишқоқ учли фрагментлар ҳосил 
бўлиши билан ишлов берилганда ва кейин мазкур намуналар 
аралаштирилганда турли хил намунадаги фрагментлар ёпишқоқ 
учларининг комплементар жуфтлашиши туфайли генларнинг янги 
комбинациялари – рекомбинант ДНК ҳосил бўлиши мумкин (расм 
6.5).