4-laboratoriya ishi. Bakteriyalarning o„sish hususuyatini bul‟onda
kuzatish
Strentokokklar suyuq oziq muhitlarida idishning tubida yoki devor-
larida ipr-iprlar ko‗rinishida o‗sadi va bulonni tiniq qoldiradi. Stren-
tokokklar go‗sht tepton bulyonida cho‗kma bilan bir tekis loyqalanish
beradi. Vabo vibrioni 1% qoshilgan suvda nozik ko‗kimtir kul rang par-
da ko‗rinishida o‗sadi, muhitning qolgan qismi bir teks sal loyqalanadi,
halos. Ba‘zi bir mikroorganizmlar probirkaning devorida o‗sadi va
bulyon tiniq qoladi.
5-laboratoriya ishi. Anaeroblarni kulturalash usullari
Anaerob bakteriyalarni sun‘iy ozuqa muhitida o‗stirish uchun
kislorodsiz sharoit hosil qilish kerak. Buning uchun fizikaviy, kimyoviy
va biologik usullar qo‗llaniladi. Anaerastat yoki eksikatordan havoning
bunday haydalishini piragalo yordamida kimyoviy yo‗l bilan kislorodni
92
biriktirish vositasida hosil qilish mumkin: biologik yo‗l bilan Fortner
usuli yordamida, ya‘ni kislorodsiz sharoitni aerob va anaerob bakte-
riyalarni birga germetik yopiq Petri kosachasida ekilganda hosil qiladi.
Birinchi kun:
Bakteriyalardan toza kultura olish uchun tekshiri-
luvchi Qizitish usuli- spora hosil qiluvchi basillalarni, sporasizlardan
ajratib olish.
Material Kitt.
Tarosi muhitli probirkaga ekiladi. Muhit ekishdan
oldin suv hammomida 10-20 min davomida (havoni kislorod aralash-
masida ajratish uchun qizdiriladi, so‗ng termostatda 37
0
C da o‗stiriladi).
Ikkinchi kun:
Ekilma kuzatiladi, surtma tayyorlab Gramm usulida
bo‗yaladi. Musbat bo‗lsa, muhitda loyqalanish, gaz pufakchalari va surtmada
yirik sporali Grammusbat tayoqchalar kuzatiladi. Toza kultura ajratish uchun
Kitta-Taposi muhitidan material olib, ilmoqchada birinchi Petri kosachasiga
– qonli agarga ekiladi va muhitning yuqori qismida shpatel bilan
taqsimlanadi. Huddi shu shpatel bilan material muhitga ikkinchi va uchunchi
kosachaga alohida kolloniya hosil qilish uchun suriladi.
Uchunchi kun:
Chashkada o‗stirilgan kolloniya lupa yordamida
o‗rganiladi va hosil bo‗lgan kolloniyani probirkaga solib, termostatga
solinadi. Aniqlanuvchi bakterialarning morfologik, kultural va bir
biokimyoviy xususiyatlari o‗rganiladi. Kitta-Taposi muhiti aneroblarni
kulturalashda universal muhit hisoblanadi. U qonli bulon, hayvon
to‗qima bo‗lagidan iborat. Anaerob sharoit hosil qilish uchun muhit
ustiga sterillangan o‗simlik moyi quyiladi.
a)
Havoni haydash- kislorodni muhitdan mexanik yo‗l bilan
haydash. Buning uchun mahsus asboblar(anaerostatlar) yordamida havo
haydab chiqariladi.
b)
Havo kislorodidan mexanik himoyalanish. Buning uchun Vinyal-
Veyon usuli qulay 30 sm uzunlikdagi, 3-6 mm kenglikdagi shisha
naychaning bir tomoni kapillyarga solinadi, boshqa tamoni esa paxtali
probirkaga quyiladi va tekshirilayotgan material ilitilgan agarga ekiladi.
So‗ng aralashtirilib, sterillangan naychaga solinadi. Aralashma
kapillyarga quyiladi va naycha termostatga qo‗yiladi.
d) Biologik usul- aerob va anaerob kulturalarni bir yerga ekish
(Fortner usuli). 2 ga bo‗lingan Petri kosachasiga qalin qatlam qonli
agarga ekiladi. Sterillangan skalpel bilan chashka o‗rtasidan bo‗linadi.
Agarning birinchi yarmiga aerob, ikkinchi yarmiga anaerob
qulturasi ekiladi. Chashka parafin bilan to‗ldiriladi va termostatga
qo‗yiladi. Avval kislorodga to‗yingan aeroblar o‗sib chiqadi, so‗ng
anaeroblar o‗sib chiqadi.
93
Do'stlaringiz bilan baham: |