3.2. Глюкозопептонная среда Эйкмана.
В 100 см
3
воды рас-
творяют 10 г пептона, 5 г хлорида натрия, нагревают смесь до кипе-
ния, фильтруют, прибавляют 10 г глюкозы, устанавливают рН 7,4–7,6,
128
разливают в пробирки или флаконы с поплавками и стерилизуют при
0,05 МПа в течение 20 мин.
3.3.
Среда Кесслера
. К 1 дм
3
воды добавляют 10 г пептона, 50 см
3
свежей бычьей желчи. Смесь кипятят при помешивании до полного рас-
творения пептона, фильтруют через вату, растворяют 2,5 г лактозы, до-
водят объем до 1 дм
3
и устанавливают реакцию среды (рН 7,4–7,6). За-
тем добавляют 2 см
3
генцианвиолета, разливают в пробирки или колбы
с поплавками и стерилизуют при температуре 121 ºС в течение 15 мин.
Среда Кесслера выпускается отечественной микробиологиче-
ской промышленностью в виде сухого порошка. В лабораториях ее
готовят согласно прописи, указанной на этикетке.
3.4. Среда Симмонса
. Среда предназначена для определения
способности энтеробактерий утилизировать цитраты.
Состав среды
г/дм
3
Аммония фосфат двузамещенный ............................................. 1,6
Динатрия фосфат ......................................................................... 1,1
Магния сульфат ........................................................................... 0,2
Натрия цитрат
3,2
Натрия карбонат .......................................................................... 0,05
Бромтимоловый синий водорастворимый ................................ 0,05
Натрия хлорид ............................................................................. 6,0
Агар ............................................................................................... 9,0
Приготовление.
Компоненты среды растворяют в дистиллиро-
ванной воде, кипятят в течение 2–3 мин до полного расплавления ага-
ра. Значение рН среды 7,0–7,2. Среду разливают в пробирки по 4 см
3
и стерилизуют при температуре 112 ºС в течение 20 мин. Перед ис-
пользованием агар расплавляют в пробирках на водяной бане и осту-
жают их в наклонном виде. Цвет готовой среды оливково-зеленый.
Посев и интерпретация результатов.
На цитратный агар
Симмонса наносят минимальное количество посевного материала,
свободного от среды, на которой выращивались микроорганизмы.
Контрольную пробирку оставляют незасеянной. Посевы инкубируют
при температуре 37 ºС. Учет результатов проводят каждые 24 ч в те-
чение 5 суток. Микроорганизмы, способные утилизировать цитраты,
растут на среде Симмонса и изменяют ее цвет из зеленого в синий
129
(положительная
реакция),
а
микроорганизмы,
неспособные
утилизировать цитраты, не растут на этой среде и не изменяют ее
цвета (отрицательная реакция).
Do'stlaringiz bilan baham: |