O„zbekiston respublikasi oliy va o„rta

«Teofedrin» tabletkasi tarkibidagi komponentlarni ajratish chizmasi

Foydalanilgan adabiyotlar.
1. James W. Robinson, Eileen M. Skelly Frame, George M. Frame II Undergraduate Instrumental Analysis // Crystallography, Rigaku Americas
Corporation, The Woodlands, TX. www.rigaku.com/smc. © Rigaku Corporation. 2.Loginova N.V., Polozov G.I. Vvedenie v farmatsevtichekuyu ximiyu Minsk,
Elektronnaya kniga BGU, 2004.

3. 
   Farmatsevtichna ximiya pod redaktsii P.O. Bezuglogo, Xarkov - 2002 g.
   
4. 
   Farmatsevtichniy analiz pod redaktsii P.O. Bezuglogo, Xarkov -2001 g.
   
5. 
   Maksyutina N.P. i dr. Metodы analiza lekarstv, Kiev, 1984.
   
6. 
   Arzamastsev i dr. Analiz lekarstvennыx smesey. Moskva 2000 g.
   
7. 
   "Dori vositalarining sifatini nazorat qilish va standartlash" fani uchun o‘quv qo‘llanmasi (Elektron darslik) Mualliflar jamoasi.
   
8. 
   Mavzular bo‘yicha uslubiy qo‘llanmalar.
   
9. 
   Rukovodsvo k laboratornыm zanyatiyam po farmatsevticheskoy ximii, pod redaktsii A.P.Arzamastseva, Moskva, 2001 g.
   

11. Mavzu. YUSSX usuli, ularning turlari. Qo„lanish soxasi, uskunalar, xromatografik kolonkalar, detektorlar, xromatografiya sharoitlari. Aylanma

fazali YUSSX. Dori vositalarini taxlilida qo„llanilishi.
Reja:

1. 
   YUSSX usuli, ularning turlari va tasnifi.
   
2. 
   YUSSX usulida qo‗lanish soxasi, uskunalar, xromatografik kolonkalar, detektorlar, xromatografiya sharoitlari.
   
3. 
   Aylanma fazali YUSSX usulini dori vositalarini taxlilida qo‗llanilishi YUqori samarali suyuqlik xromatografiyasi suyuqlik xromatografiyasi
   

usulining bir ko‗rinishi bo‗lib, bunda qo‗zg‗aluvchan faza – elyuent kolonkadagi sorbentdan kattatezlikda yuqori bosim ostida o‗tadi. Usul yuqori va quyi molekulali issiqlikka chidamsiz moddalarni ajratib olishga, ularning chinligini va miqdorini aniqlashga imkon beradi.
Hozirgi zamon xromatografiyalari quyidagi qismlardan tashkil topgan: yuqori samarali kolonka, dozator, yuqori bosimli nasos, yozuv qurilmali detektor, mikroprotsessor (rasm 31). Xromatograflar, shuningdek namunalarni avtomatik ravishda kolonkaga yuborish, reja asosida xromatografiyalash muhitini ushlab turish, ajratish jarayonining qulay sharoitini avtomatik tanlab berish, tahlil qilinayotgan aralashma tarkibidagi moddalarning chinligi va miqdorini aniqlab beruvchi moslamalar bilan ta‘minlangan.
YUqori bosimli nasos (200-500 atmgacha) elyuentni berilgan doimiy tezlikda kolonkaga etkazib beradi. Ba‘zida mikrokolonkali xromatograflarda nisbatan past bosimli nasoslar qo‗llaniladi (1-20 atmgacha). Xromatografik kolonkalar zanglamaydigan po‗lat (yoki shisha)dan tayyorlangan bo‗lib, uzunligi 10-25 sm, ichki diametri 0,3-0,8 sm (ko‗pincha 0,4-0,5 sm) gateng. Kolonkalar diametri 5-10 mkm bo‗lgan dumaloq yoki notekis shakldagi adsorbent bilan yuqori bosimda suspenzion usul yordamida to‗ldiriladi. Suspenzion usul bilan to‗ldirilganda sorbent kolonkada bir tekis bo‗lib zich joylashadi. Mikrokolonkali xromatograflarda kolonkalarning uzunligi va ichki diametri kichik bo‗ladi (0,1- 0,2 sm va undan ham kichik).
YUqori samarali suyuqlik xromatografiyasida qo‗llaniladigan adsorbent zarrachalari yuqori bosim ostida parchalanmasligi kerak. Zich joylashgan kichik diametrli (5-10 mkm) adsorbent bilan to‗ldirilgan kolonkalar aralashmalarni yuqorisamarali xromatografik taqsimlash xususiyatiga ega. Xromatografiyalash jarayoni ketayotgan vaqtda kolonka harorati ±0,1⁰S aniqlikda ushlab turiladi. Xromatografik taqsimlanish ko‗pincha 20-25⁰ da olib boriladi.
YUqori samarali suyuqlik xromatografiyasida ko‗pincha refraktometrik yoki flyuorimetrik, to‗lqinuzunligi o‗zgaruvchan (190-900nm) yoki o‗zgarmaydigan (ko‗pincha 254 nm) spektrofotometrik, shuningdek, alanga-ionlanish, elektro- kimyoviy, mass-spektrometrik va boshqa detektorlar ishlatiladi.
Adsorbent sifatida ko‗pincha gidroksil guruhlar bilan qoplangan silikagel, turli funksional guruhlar bilan ishlangan silikagel, alyuminiy oksidi, polimerlar, amaliyotda esa tayyor kolonkalar ishlatiladi. Silikagel bilan to‗ldirilgan kolonkalar bilan ishlashda elyuent sifatida uglevodorodlar, ba‘zida esa turli
erituvchilar yoki spirt bilan aralashtirilgan uglevodorodlardan foydalaniladi.
Gidrofob guruhlar bilan qoplangan silikagel bilan to‗ldirilgan kolonkalarni yuvishda esa tarkibida quyi spirtlar yoki atsetonitril bo‗lgan suvli eritmalar ishlatiladi. Ba‘zida erituvchilar ikki marta tozalangan bo‗lishi kerak. Tuz, kislota va asos ko‗rinishidagi organik birikmalarni ajratishda juft-ion xromatografik usuldan foydalaniladi. Bunda gidrofob guruhlar bilan qoplangan silikagel adsorbenti, anion yoki kation tarkibida gidrofob guruh saqlovchi ionli birikmalar qo‗shilgan suv-spirtli yoki suv-atsetonitrilli elyuentlar ishlatiladi.
Organik tuzilishga ega bo‗lgan anion va kationlarni ion-almashinish suyuqlik xromatografiyasi yordamida ajratiladi. Adsorbentlar sulfo-, karboksil- yoki aminoguruhlar bilan qoplangan bo‗lishi kerak. Elyuent sifatida ma‘lum rN muhitga va ion kuchiga ega bo‗lgan suvli bufer eritmalar ishlatiladi.
Metall kationlari bilan kompleks hosil qiluvchi moddalarni ajratishda ligand almashinish xromatografiyasi usulidan foydalaniladi. Taqsimlanish yoki moddalarning ajralishi tekshirilayotgan birikmalarning koordinatsion bog‗lar hosil qilish xususiyatlari o‗rtasidagi farqqa asoslangan bo‗lib, ko‗pincha aminokislotalarning izomerlari tahlil qilinadi. Adsorbentlar metal ionlari va ajralayotgan modda bilan kompleks birikmalar hosil qiluvchi guruhlar bilan qoplanganbo‗ladi.
Moddalarning ajralish darajasi xromatogrammadagi ikki qo‗shni cho‗qqilarning balandliklari o‗rtasidagi masofa va xromatografik chizmaning kengligi bo‗yicha aniqlanadi. CHo‗qqilar balandligi o‗rtasidagi masofa aniqlanuvchi moddaga nisbatan adsorbentning selektivligiga, kengligi esa adsorbentning joylashishiga va elyuentning quyuqlik darajasiga bog‗liq. YUqori samarali kolonka adsorbentning selektivligi kichik bo‗lsa ham moddalarni ajratib berish xususiyatiga ega.
Moddalar miqdorini aniqlashda xromatogramma mutlaq kalibrlash yoki ichki standartlar (gaz xromatografiyasi usuli kabi) usullari yordamida tahlil qilinadi. YOt moddalar xromatogrammadagi cho‗qqilarni solishtirish bo‗yicha aniqlanadi. Bir hil muhitda moddaning kolonkadan chiqish vaqti bir xil va doimiy bo‗ladi va bu xususiyatdan aniqlanuvchi birikmaning chinligini aniqlashda foydalaniladi. Miqdoriy tahlilda cho‗qqilar yuzalari hisoblanadi, chunki cho‗qqi yuzasi moddaning miqdoriga to‗g‗ri mutanosib.

Rasm 31. YUqori samarali suyuqlik xromatografining tuzilish chizmasi

1. 
   – qo‗zg‗aluvchan faza solingan idish, 2 – nasos, 3 – tekshiriluvchi namunani kiritish joyi, 4 – xromatografiyalash kolonkasi, 5 - detektor
   

Baliq moyitarkibidagi viatmin A miqdorini YUqorisamarali suyuqlik xromatografiyasi usulida an qlash
Aniqlanuvchi eritmani tayyorlash:
0,7 g baliq moyi (aniq tortma) 25 ml hajmli o‗lchov kolbasida geksanda eritiladi va belgisigacha geksan bilan etkaziladi. Tayyorlangan eritma xromatografik kolonkaga yuborishdan oldin sentrifugalanadi.
Standart eritmani tayyorlash:
0,035 g yoki 0,021 g (aniq tortma) faolligi 1 yoki 1,7 mln-ME/g bo‗lgan retinol palmitatning moyli eritmasi hajmi 100 ml bo‗lgan o‗lchov kolbasiga solinadi, geksanda eritiladi va belgisigacha etkaziladi. Tayyorlangan eritmadan 2 ml olib, hajmi 50 ml bo‗lgan o‗lchov kolbasiga solinadi va geksan bilan belgisigacha etkaziladi. Eritma xromatografik kolonkaga yuborishdan oldin sentrifugalanadi. Eritmani qorong‗i, harorati 0⁰Sdan oshmagan joyda 5 kun davomida saqlash mumkin.
Xromatografiyalash sharoitlari:
Silasorb-600 (zarracha kattaligi 5 mkm) sorbent bilan to‗ldirilgan 120x2 mmli kolonka. Qo‗zaluvchan faza: geksan-dietilefiri (99,8:1,2). Oqim tezligi – 200 mkl/min. Kolonka harorati – hona xarorati. Detektor – UB- spektrofotometr, 326 nm.
Aniqlanuvchi va standart eritmalar hajmi – 10 mkldan. Xromatografiyalash kamida 3 marta qaytariladi. Bitta tahlil uchun elyuent hajmi – 2000 mkl. Retinol palmitatning ushlanish vaqti: 1,3-sis-izomer – 580 mkl (2,9 minut), trans-izomer (to‗liq) – 710 mkl (3,5 minut).
Aniqlash tartibi:
Xromatograf yuqorida keltirilgan sharoitda tayyorlanadi. Namunalar kolonkaga yuboriladi va retinol palmitatning cho‗qqilari bo‗yicha sistemalarni ishlatish mumkinligi xaqidagi 1 va 2 mezonlar hisoblanadi.
Baliq moyi tarkibidagi A vitamin xromatogrammadagi 2 ta cho‗qqi retinol palmitatning 1,3-sis va trans izomerlarining ushlanish vaqti bo‗yicha aniqlanadi.
A vitamin miqdori (X) 1 gpreparatga nisbatan MEda quyidagi formula bo‗yicha hisoblanadi:

buerda: S_i–aniqlanayotgan eritmadagi retinol efirlari cho‗qqilari yuzalarining yig‗indisi;

S_s–standart eritmadagi retinol efirlari cho‗qqilari yuzalarining yig‗indisi C_s-standart eritmadagi A vitaminining ME/ml dagi konsentratsiyasi m–baliq moyining aniq og‗irligi
25 – suyultirish hajmi, ml
Baliq moyi tarkibidagi A vitamining miqdori 350-1000 ME/g bo‗lishi
kerak.