Ii -laboratoriya mashg’uloti texnikasi bilan tanishtirish

usul. Yuqoriga ko’tariluvchi xromotografiya.

Ishning bajarilishi. Eni 1,5 sm, uzunlig 15 sm keladigan feltr qog’oz kesib olinib, yuqoriga qismiga 15-20 sm uzunlikda ip utkazib olib quyiladi. Qog’oz lentaning pastki chekkasida 1 sm yuqoriga 3-4 mm diametrda qora grafik qalamda doira chizib quyiladi. Doiraning o’rtasiga kaplya ryoki mikropepitka yordamida aminokislota aralashmasi (masalan, glyutamat kislota, alanin va lisin aralashmasi) tomiziladi va quritiladi.

Diametri 2-2,5 sm uzunligi 18-20 sm keladigan probirka olib, devoriga tegizmasdan 15-20 tomchi (2 mm) suvga to’yingan fenol (yoki butanol) quyiladi. Tayyorlangan qog’oz lintani bog’langan ipdan ushlab, 2-3 mm chuqurlikga erituvchi botguncha tushurilib, qog’ozni probirka devoriga tegizmay va aniq vertekal xolatini saqlab, probka (qopqoq) Bilan berkitib quyiladi. Probirka 35-40⁰S termostatda 90-120 minut davomida qoldiriladi. Shu vaqt ichida erituvchi fronti 10-12 sm ko’tariladi. Ko’rsatilgan vaqt o’tgandan keyin xromotogramma olinib, 10-15 minut davomida –to fenol yoki boshqa erituvchi batomom uchib ketguncha 50-100⁰S quritgich shkafiga osib quyiladi.

Erituvchi uchub ketgach, qog’oz lentani olib shtativga ilib quyiladi va unga 0,5% ningidrin eritmasidan pulverzator yordamida purkaladi yoki kyuvetaga ningidrin eritmasi quyib, unga xromotografik qog’oz botiriladi. Yana 100-110⁰S quritgich shkafiga 5-6 minut ilib quyiladi. Natijada qog’ozning aminokislota tuxtagan joyi ko’k, ko’kish –binafsha ranga bo’yaladi. Keyin lineynka yordamida har bir aminokislota uchun Rf –aniqlanadi.