И правила работы в лаборатории биохимии

3.5. Хроматографические методы 
Хроматография (от древнегреческого χρ
ῶ
μα – цвет) – это ме-
тод разделения смесей веществ и изучения их физико-химических 
свойств (анализа). Название метода связано с первыми экспери-
ментами по хроматографии, в ходе которых разработчик метода 
Михаил Семенович Цвет разделял ярко окрашенные растительные 
пигменты. Первое сообщение о разработке метода хроматографии 
было сделано М.С. Цветом 30 декабря 1901 г. на XI Съезде естество-
испытателей и врачей в Санкт-Петербурге. Первая печатная работа 
по хроматографии была опубликована в 1903 г., в журнале 
Труды 
Варшавского общества естествоиспытателей
. Впервые термин 
хро-
матография
появился в двух печатных работах М.С. Цвета в 1906 г., 
опубликованных в немецком журнале 
Berichte der Deutschen Botani-
schen Gesellschaft
.
Метод основан на распределении веществ между двумя 
фазами – 
неподвижной
и 
подвижной
. 
Неподвижной 
(
стационар-
ной) фазой служит твердое пористое вещество (часто его называют 
сорбентом
) или пленка жидкости, нанесенная на твердое вещество. 
Подвижная 
фаза представляет собой жидкость или газ, протека-
ющий через неподвижную фазу, иногда под давлением. Компоненты 
анализируемой смеси (
сорбаты
) вместе с подвижной фазой пере-
двигаются вдоль фазы стационарной. Ее обычно помещают в стек-
лянную или металлическую трубку, называемую 
колонкой
. В зави-
симости от силы взаимодействия с поверхностью сорбента (за счет 
адсорбции или по какому-либо другому механизму) компоненты 
будут перемещаться вдоль колонки с разной скоростью. Одни ком-
поненты останутся в верхнем слое сорбента, другие, в меньшей 

---

54 
степени взаимодействующие с сорбентом, окажутся в нижней части 
колонки. Таким образом происходит быстрое разделение сложных 
смесей компонентов. 
Хроматограмма
, являющаяся зависимостью сигнала прибора 
(ось ординат) от времени или объема подвижной фазы (ось абсцисс), 
представляет собой совокупность пиков разделяемых компонентов. 
Типичная хроматограмма приведена на рис. 12. 
Рис. 12. Хроматографическое разделение смеси веществ 
[http://www.nkj.ru/archive/articles/16710/] 
Время от момента ввода анализируемой пробы в хромато-
графическую колонку до момента регистрации максимума пика 
называется