Gen regulyatsiyasi molekulyar mexanizmlari. Transformatsiya va transduksiya. Mundarija: Kirish

Transfektsiya - bu bakteriyalar o'rniga, odatda, hayvonlar hujayralari plazmid transformatsiyasining bir turi. Bu jarayon siz ishlab chiqarayotgan konvertatsiyaga qaraganda ancha murakkabroq, chunki laboratoriyada o'stirilgan ko'plab eukaryotik hujayralar begona DNKni o'zlashtirmaydi va ko'paytirmaydi. Shunga qaramay, olimlar hujayralarga plazmidlar va boshqa begona DNKlarni kiritishning ko'p usullarini kashf qilishdi. Bakteriyalarga o'xshab, kimyoviy va fizik usullar ham bor, ular hujayra membranasida vaqtinchalik teshiklarni hosil qiladi va begona DNKni oladi. Bu usullar bakterial transformatsiyaga o'xshash usullar bilan ishlaydi, chunki ularning barchasi hujayra membranasining o'tkazuvchanligini oshirishga mo'ljallangan. Bu usul bakteriyalardan farq qiladi, lekin buning o'rniga katyonik lipidlar, misellar, lazerlar yoki hatto zarracha qurollari ishlatiladi. Bu usullarning ijobiy va salbiy tomonlari bor, lekin oxir -oqibat mavjud manbalarga va tadqiqotchining xohishiga bog'liq bo'ladi. Oxirgi mashhur usul - transduksiya boshqa ikkita usuldan o'ziga xosdir. Transduktsiya - bu DNK bo'laklari yoki plazmidlarini prokaryotik yoki eukaryotik hujayraga etkazib berishda vositachilik qilish uchun virusdan foydalanish jarayoni. Bu usul DNKni yuqtirgan uy egasiga kiritish uchun viruslarning tabiiy funktsiyasidan foydalanadi, lekin burilish bilan. Olimlar o'ziga xos DNK ketma -ketligini o'z ichiga olgan virusli nuklein kislotalarni o'zgartirishi mumkin. Rekombinant nuklein kislotalarni mezbon hujayralarga kiritish uchun manipulyatsiya qilinadigan turli xil virus turlari mavjud. Masalan, bakteriofag DNKni bakteriyalarga, lentiviruslar yoki adenoviruslarni esa inson hujayralariga kiritadi. Tadqiqotchilar ushbu o'zgartirilgan viruslardan foydalanib, begona DNKni mezbon genomga kiritadilar (masalan, lentiviruslar yoki bakteriofaglar yordamida) yoki kerakli rekombinant nuklein kislotalarni vaqtincha ifoda etadilar (masalan, adenoviruslar yordamida). Transduktsiyani amalga oshirish uchun sizga qiziqish katakchasi va bu hujayra chizig'ini yuqtirgan virus kerak. Bu usul bu erda muhokama qilingan boshqa usullarga qaraganda qiyinroq bo'lishi mumkin, chunki virusni madaniyatda o'stirish va saqlash kerak, ba'zida odamlarga yuqtirmaydigan qilib o'zgartirish kerak va qiziqqan DNKni virus zarrachasiga qadoqlash kerak. yangi xost hujayralari infektsiyasi paydo bo'lishi mumkin. Qiyinchiliklarga qaramay, virusli transduktsiya laboratoriya sharoitida barqaror, uzoq muddatli o'zgarishlarni amalga oshirishning ajoyib usuli hisoblanadi.