Радиометрический метод предполагает введение метки по 14С в виде СО2. С этой целью лист (целое растение) экспонируется с 14СО2 в течение короткого (менее 60 с), но точно изморенного, периода времени. Затем лист срезают, фиксируют в жидком азоте и определяют содержание в нем 14С, которое прямо пропорционально ИФ. Метод широко используется для полевого измерения.
Недостатки метода: во-первых, он приводит к гибели растения, во-вторых, может систематически завышать ИФ, особенно у С3-растений, обладающих в сравнении с С4-растениями значительным фотодыханием.
Полярографическое определение О2 при помощи электрода, прикладываемого к листовой высечке, является более дешевым методом, альтернативным газометрическому. Он может дать дополнительную информацию, например, о том, что отношение между выделившимся О2 и поглощенной СО2 не всегда равно 1. Электрод для листовой высечки можно использовать для измерения максимальных скоростей фотосинтеза в условиях насыщения СО2. Этим же способом удобно проводить измерение скорости фотосинтеза в зависимости от освещенности.
Фотосинтетическую активность изолированных хлоропластов также наиболее целесообразно измерять при помощи кислородного электрода (дает возможность определять в суспензии содержание О2 порядка 0,01 мкмоль).
ЭНДОГЕННЫЕ МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ ФОТОСИНТЕЗА
Проводимость листа. Проводимость листа для молекул СО2, тесно коррелирует с ИФ. Различают устьичную и остаточную проводимость. Последняя представлена главным образом проводимостью мезофилла. Проводимость - это величина, обратная сопротивлению (измеряется в см/сек).
Устьичная проводимость (УП), или проводимость в газовой фазе, у растений колеблется от 1 см/с, когда устьица широко открыты, до 0,02 см/с при закрытых устьицах.
Проводимость мезофилла (МП), или проводимость молекул СО2 в жидкой фазе, при их прохождении через клеточные стенки, мембраны, цитозоль и двойную мембрану хлоропласта к местам карбоксилирования в стреме определяется прежде всего активностью карбоксилирующих ферментов фотосинтеза. МП имеют значения 0,1-0,5 см/с у С3-растений и 0,5 см/с у С4-растений. Более высокая МП у С4-видов объясняется главным образом незначительным фотодыханием. УП у С4-видов, напротив, ниже, чем у С3-видов, что обусловлено как меньшим числом устьиц на единицу площади листьев, так и меньшими размерами устьичных щелей. Однако суммарная проводимость листа для молекул СО2 в целом выше для С4 -растений, что определяет преимущество последних по ИФ.
Do'stlaringiz bilan baham: |