Biokimyo va molekulyar biologiya

24 – laboratoriya mashg`uloti

Jigardan nukleoproteidlarni ajratish
Jigar, taloq, oshqozon osti bo’zi, buyraklar va achitqi nukleoproteidlarga boy hisoblanadilar. Ular ishqoriy eritmalarda erib, kislotali eritmalarda cho‘kmaga tushadi. Dezoksiribonukleitidlar tuzli eritmalarda ham yaxshi eriydi.

Kerakli asbob va reaktivlar: a) mol yoki cho‘chqaning muzlatilgan yangi jigar yoki talog‘i. b) natriy xlorning 5% li eritmasi. v) taxta tayoqcha.

2-2,5 g taloq yoki jigarni mayda bo‘lakchalarga bo‘lib xavonchada 5% li NaCl va maydalangan shisha bo‘lakchalari yordamida yaxshilab o’ziladi. Tuzli eritmani oz-ozdan solib boriladi. Jami 80 ml tuzli eritma sarflanadi.

Taloq 12-15 daqiqa davomida gomogen massa hosil bo‘lgunga qadar o’ziladi. Hosil bo‘lgan massani probirkalarga solib, 10-15 daqiqa davomida sentrifugalanadi. So‘ng sentrifugatni shisha silindrga solib hajmi o‘lchanadi.

SHisha stakanga distillangan suv quyilib (suvning hajmi sentrifugandan 6 marta ko‘p bo‘lishi kerak) taxta tayoqcha yordamida sekinlik bilan aralashtirilgan holda ustiga sentrifugat quyiladi. Dezoksiribonukleoproteidlar ip ko‘rinishida cho‘kmaga tusha boshlaydilar va tayoqchaga o‘raladi.