Ўзбекистон республикаси соғЛИҚни сақлаш вазирлиги тошкент фармацевтика институти

Дибензазепинлар ва бензодиазепинлар.
Газохроматографик усулда дибензазепинлар ва уларнинг
метоболитларини биосуюқликларда миқдорини аниқлаш усулларини жуда кўп ишларда кўриш мумкин.
С.П.Акчурина ва Б.Н.Изотовлар хлордиазепоксид ва диазе-
памни қон плазмасидан, уларнинг метоболити бензофенон асосида аниқлаш методикасини ишлаб чиқишган.
1 жадвал
Айрим фенотиазин хосилаларини ГСХ ушланиш
параметрлари (вақт,дақиқа)

Бирикмалар номи	Колонка харорати ^0С
	165^0С	180^0С	210^0С
Хлорпромазин	5,7	27	0,9
Хлорпромазин гидрохлорид	6,2	30	-
этапромазин	3,7	-	-
Этапромазин гидрохлорид	4,1	20	-
Флюфеназин	13	-	6,6
Флюфеназин гидрохлорид	13	13	7,3
Мепазин	7,3	33	-
Мепазин гидрохлорид	7,7	35	-
Метоксипрамазин	8,5	38	-
Метоксипрамазин малсат	9,5	43	-
Перфеназин	13	-	13
Прохлорперазин	32	125	2,9
Прохлорперазин дималсат	37	138	3,0
Прохлорперазин этандисулфант	13	-	2,8
Прохлорперазин дигидрохлорид	13	-	3,1
Промазин	3,3	-	-
Промазин гидрохлорид	3,7	-	-
Прометазин	2,9	-	-
Прометазин гидрохлорид	3,0	-	-
Пиратиазин	7,3	33	-
Пиратиазин гидрохлорид	7,6	35	-
Тиопроазат	13	13	13
Тиопроазат дигидрохлорид	13	-	-
Тиоридазин	61	227	4,7
Тиоридазин гидрохлорид	70	233	4,7
Трифлюперазина	12,1	53	1,4
Трифлюперазина дигидрохлорид	12,4	57	1,7
трифлюпрамазин	2,2	-	-
трифлюпрамазин гидрохлорид	2,6	-	-
Тримепразин	3,1	-	-
Тримепразин тартрат	3,2	-	-

Бунинг учун қон ёки қон плазмаси намунаси хлороформ билан экстракцияланади, эритувчи қуругунча хайдалади, қуруқ қолдиққа 6н HCl қўшиб, 120⁰С хароратда 20 дақиқа қиздириб гидролизланади.
Гидролизат мухити рН=10-11 га келтирилгач бензол билан экстракцияланади. Бензол қатлами қуругунча порлатилгач, қолдиқ ацетонда эритилади ва хроматографик текширилади.
Хроматограф Цвет-106, доимий тезликни комбинацияловчи
детектор, колонка узунлиги 100см х 0,35 мм, фаза-3% полиэтиленгликол 20000 сақлаган хроматон N-AW-HMDS, заррачалар ўлчами 60-75 меш билан тўлдирилган 2-амино-5-5хлорбензофенон (бензофенонхлордиазепоксид). Колонканинг ишчи харорати 190⁰С 2-метиломино-5-хлорбензафенон (бензафенон диазепам) учун эса 150⁰С. Детектор харорати 260⁰С, қўзғалувчи газ азот, 80 мл/дақиқа, ушланиш вақти бензофенонхлордиазепоксид учун-12 дақиқа, бензофенон диазепам учун-10 дақиқа.
Имипрамин – ва унинг бази асосий метоболтиларини биологик намунадан аниқлаш учун сезгир босқич уларни экстракциялашга, сўнг ГСХ усулда аниқлашга асосланган. Сезгирлик даражаси 0,01-0,05 мг гача боради. 2-окси-дисметилимипрамин учун 0,2-0,3мг
ГСХ. 3% OV-255 сақлаган газохром G (60-80меш) билан тўлдирилган шиша колонкада 235⁰С хароратда бажарилади, қўзғолувчи газ-азот, 100 мл/дақиқа тезликда ушланиш вақти оксазепам учун 0,8 дақиқа, диазепам – 1,4 дақиқа, празепам-2,4 дақиқа (ички стандарт), N-диеметилдиазепам-3,5 дақиқа, 3-оксидиазепам-7,9 дақиқа.
J. A. F. De Silva ходимлари билан хакорликда диазепам ва N-метилли метаболтиини қондан аниқлаш техникасини яратдилар. Усул диазепамни бензафенон хосиласигача гиролизлаб сўнг ГСХ усулда аниқлашга асосланган диазепам тўғридан-тўғри хроматографик аниқлашга ҳам бўлади, лекин бензафенонгача гидролизланса сезгирлик 10 марта ортади. Бунинг учун қон намунаси эфир ёрдамида экстракцияланади ва экстракт 6н HCl эритмаси билан ишланади. 1 соат давомида 100⁰С хароратда гидролизлангач, ҳосил бўлган бензафенонни эфир билан экстракцияланади, аниқлаш силан ва 190⁰С хароратда 2% карбовакс М шимдирилган газхром Р билан тўлдирилган колонкада бажарилди. Электрон йиғувчи детектор ёрдамини ё мл қондаги 0,02-0,03 мкг моддани аниқлаш мумкин. Метилланган 2-хлор-5-бензофенон учун ушланиш вақти 5,5 дақиқа, амино-2-хлор-5-бензофенон учун 11,2 дақиқага тенг. Авторлар оксибензофенонни ўрганишмади, чунки қонда гидролилли метоболитлар аниқланмаган.
Кейинчалик A.G. Howard хамкорликда диазепамни ва унинг N-диметил-диазепам, 3-оксидиазепам ва оксазепам кўринишидаги метоболитларини қон зардоби ва пешобдан тез ажратиш усулини таклиф этдилар. Бунинг учун қон зардоби ёки пешоб рН мухитини ацетатли буфер билан 5,3 га келтириб бензодиазепин глюкозидларини гидролизлаш учун -глюкронидаза қўшиб 2 соат 37⁰С хароратда инкубация қилинди. Ички стандарт қўшиб этилбензоат билан экстракцияланади. Органик қатлам электрон ушловчи детекторли хроматографда аниқлаш учун юборилди.
Клоназепам ва унинг 2 та асосий метоболитлари одам қони зардобидан ажратиш ва аниқлаш усули яратилган.
Қон зардоби ички стандарт сифатида 7-аминоклоназепам қўшиб этилацетат эфири билан ажратиб олинди.
1. Эритувчи азот оқимида порлатилди, қолдиқ 0,01н хлорид кислотаси эритмасида эритилди ва н-гексан билан ювилди. Кислотали сувли эритмадан клонозепам ва ички стандарт толуол билан экстракцияланиб хроматограф колонкасига юборилди (клонозепам).
Аниқланувчи фазадаги зардобга иккинчи ички стандарт 7-ацетиминоклонозепам ва аралашма рН мухити 1м фосфат буфери қўшиб 7,4га келтирилди. Клонозепам метоболитлари ва ички стандартлар толуол ва этилацетат эфирининг 1:1 нисбатдаги аралашмаси билан экстракцияланди, эритувчи порлатилиб, қолдиқ толуолда эритилди ва метоболитларни аниқлаш учун хроматограф колонкасига юборилди.
Колонка материали 90 х 0,4 см ўдчамли шишадан ясалган, 1% ОV-17 сақлаган 100-120 меш ўлчамли цеолит СΨ билан тўлдирилган. Колонка харорати 270⁰С. Қўзғолувчи газ аргон-метан 90:100, тезлик 80 мл/дақиқа. Детектор электрон аниқловчи.
Аниқланиш сезгирлиги 3-5 мг/мл бўлиб клонозепам исътемол қилувчи беморлар қон зардобидан аниқлаш учун етарли ҳисобланади.
Оксазапам, диазепам, N-диметил – диазепам, N-метил-оксазепам ва нитрозепамларни сифатини ва миқдорини аниқлаш учун такомиллаштирилган газохроматографик усул тавсия этилган. Бу ишда аланга-ионизацион детекторли хроматограф қўлланилиб, шиша найли колонка 3% ОV-1 сақлаган 60-80 меш заррачали газхром – Ψ билан тўлдирилган.
Қўзғолувчи ташувчи газ-азот, тезлик 22 мл/дақиқа.
Колонка харорати 245⁰С. Ўрганилаётган моддалар ажралиши ушланиш вақтлари аниқланган.
Ички стандарт сифатида авторлар 2-бензиламино-5-хлор бензофенон қўшилган.
9 “а” - маъруза