Yupqa qatlamli xromatografiya plitasi 0 20 sm, 20 sm, 20 10 o'lchamli borosilikat shisha plastinka

Adsorbsion xromatografiya xromatografiya texnikasining eng qadimgi turi hisoblanadi. U suyuq yoki gazsimon shakldagi mobil fazadan foydalanadi. Mobil faza statsionar qattiq faza yuzasiga adsorbsiyalanadi.Adsorbsion xromatografiya adsorbatning adsorbent bilan o'zaro ta'siriga asoslangan kimyoviy aralashmani analitik ajratishni o'z ichiga oladi. Gaz yoki suyuqlik aralashmasi turli birikmalarni har xil tezlikda adsorbsiya qiluvchi adsorbent qatlamidan o'tganda ajralib chiqadi.

Adsorbent - Molekulyar kuchlar ta'sirida yuzasidagi moddalarni adsorbsiyalash uchun yuqori sirt maydoniga ega bo'lgan, odatda g'ovak tabiatga ega bo'lgan moddaga adsorbent deyiladi. Ba'zi tez-tez ishlatiladigan adsorbentlar silika jeli H, silika jeli G, silika jeli N, silikagel S, gidratlangan jel kremniy, mikrokristalli tsellyuloza, alumina, modifikatsiyalangan silikagel va boshqalar. Adsorbsion xromatografiya tajribasini boshlashdan oldin, keling, aralashmani ajratish jarayonidagi ikki turdagi faza va kuchlar turlarini tushunib olaylik.

Statsionar faza - Adsorbent adsorbsion xromatografiyada statsionar fazadir. Ishtirok etgan kuchlar erigan moddalarni adsorbentdan olib tashlashga yordam beradi, shunda ular mobil faza bilan harakat qilishlari mumkin.

Mobil faza - Adsorbsion xromatografiyada mobil faza sifatida suyuqlik yoki gaz ishlatiladi. Ishtirok etuvchi kuchlar erigan moddalarni adsorbentdan olib tashlashga yordam beradi, shunda ular mobil faza bilan harakat qilishlari mumkin. Suyuqlik mobil faza sifatida ishlatilsa, u LSC (Suyuq-qattiq xromatografiya) deb ataladi. Agar gaz mobil faza sifatida ishlatilsa, u GSC (gaz-qattiq xromatografiya) deb ataladi

Xromatografiya idishi - Shisha idishning qopqog'i bor. Bu ajralish vaqtida to'g'ri muhitni saqlashga yordam beradi.
Yupqa qatlamli xromatografiya plitasi - 20 * 20 sm, 20 * 5 sm, 20 * 10 o'lchamli borosilikat shisha plastinka.
Kapillyar naycha - Namuna aralashmasi ushbu naycha yordamida TLC ga qo'llaniladi.
Mobil faza - suyuqlik yoki gaz
Statsionar faza - adsorbentlar aminokislotalarning ajralishi.Antibiotiklarni izolyatsiya qilishda qo'llaniladi.U uglevodlarni aniqlashda ishlatiladi.U yog'lar va yog' kislotalarini ajratish va aniqlash uchun ishlatiladi. Peptidlar va oqsillarni ajratish va aniqlash uchun ishlatiladi.

Adsorbsion xromatografiya turlari: Yupqa qatlamli xromatografiya - bu xromatografiya usuli bo'lib, unda mobil faza adsorbent ustida harakatlanadi. Adsorbent nozik bir qatlam bo'lib, tarkibiy qismlarni ajratish uchun qattiq tayanchga qo'llaniladi. Ajratish differensial migratsiya orqali sodir bo'ladi, bu erituvchi shisha plitalarga yoyilgan kukun bo'ylab harakat qilganda sodir bo'ladi.

Qog'oz xromatografiyasi - bu qog'oz varaqlari yoki chiziqlaridan foydalanadigan usul bo'lib, adsorbent statsionar faza bo'lib, u orqali eritma o'tishi uchun qog'oz xromatografiyasi deyiladi. Qog'ozning qattiq yuzasi statsionar faza, suyuq faza esa mobil fazadir.
Ustunli xromatografiya - bu eritmaning erigan moddalari alohida komponentlar statsionar faza tomonidan adsorbsiyalangan ustun bo'ylab harakatlanish huquqiga ega bo'lgan usul. Adsorbentga yaqinligidan kelib chiqib, komponentlar ustunda joylashadi. Eng kuchli adsorbsiyalangan komponent ustunning yuqori qismida ko'rinadi.
Gaz-qattiq xromatografiya - GSCda ajratish printsipi adsorbsiyadir. U statsionar fazada eruvchanligi past bo'lgan eritmalar uchun ishlatiladi. Ushbu turdagi xromatografiya texnikasi juda cheklangan miqdordagi statsionar fazalarga ega va shuning uchun GSC keng qo'llanilmaydi.
Ion almashinish xromatografiyasi - bu moddalar molekulalarining suyuq elyuent bilan aloqada bo'lgan qattiq yoki g'ovakli granulalarning qattiq gidrofil moddasi yuzasiga bog'lanishi tufayli statsionar fazada ushlab turilishi. Xromatografiyaning bu variantida tutilish qarama-qarshi zaryadlangan ionlarning elektrostatik o'zaro ta'siri natijasida yuzaga keladi. Absorbsiyadan farqli o'laroq, ion almashinuvi stoxiometrik kimyoviy tenglama bilan tavsiflanadi, bu ion xromatografiyasi uchun ham muhimdir.Ammo ion almashinuvchilarda fizik adsorbsiya tez-tez kuzatiladi. Bu holda ajratish aniqlangan aralashmaning tarkibiy qismlarining statsionar fazaga turli xil yaqinligi va shuning uchun ustun bo'ylab harakatlanishning turli tezligi tufayli sodir bo'ladi. Ion almashinish xromatografiyasi ilmiy tadqiqotlarda ko'plab biokimyoviy muammolarni hal qilishda keng qo'llaniladi.Fazoviy tarmoqni tashkil etuvchi polimerlar va jellarning iplari bo'ylab qattiq granulalarning barcha tashqi va ichki yuzalarida bu sirtlarga kovalent bog'langan ionogen guruhlar ko'proq yoki kamroq teng taqsimlanadi. Agar fraksiyalangan aralashmaning tarkibiy qismlari molekulalari erish paytida ham ionlanishga qodir bo'lsa va ularning umumiy zaryadi teskari belgiga ega bo'lsa, ular elektrostatik o'zaro ta'sir kuchlari bilan statsionar ionogen guruhlarga bog'lanadi va shu bilan statsionar fazada qo'zg'almaydi.Bu bog'liqlik teskari bo'ladi: ba'zi komponentlarning ionlari boshqalar bilan almashtirilishi yoki eluentdagi sorbent ionogen guruhlarning qarama-qarshi ionlari bilan, shuningdek, bu maqsad uchun elimentga maxsus kiritilgan ionlar bilan almashtirilishi mumkin. Ion almashinuvi sodir bo'ladi.Fraksiyalash imkoniyati bu erda ularning umumiy to'lovlari qiymatlaridagi farq bilan bog'liq. Berilgan elutsiya sharoitida aralashmaning u yoki bu komponentining umumiy zaryadi qancha ko'p bo'lsa, uning ion almashinuvchi bilan o'zaro ta'siri shunchalik kuchli bo'ladi va u kolonna bo'ylab sekinroq harakat qiladi.Ion almashinadigan xromatografiyada statsionar faza sorbentning granulalar tashqarisida va ularning g'ovaklarida qattiq sirtini, to'g'rirog'i, polimer filamentlarining o'zini emas, balki uning ustiga sochilgan va u bilan bog'langan ionogen guruhlarni hosil qiladi. Moddaning molekulalarining bu guruhlar bilan Kulon o'zaro ta'siri ularning statsionar fazada saqlanishini belgilaydi.
Sorbentning ion guruhlari tarkibida u yoki bu qarama-qarshiliklar ham dastlab nazarda tutilgan. Suvli erituvchi bilan aloqa qilganda, qarshi ionlar ionogen guruhlardan ajralib, zaryadlangan ionlarni matritsaga bog'lab qo'yishi mumkin, shuningdek, boshqa qarshi ionlar yoki moddaning kattaroq ionlari bilan almashtirilishi mumkin. Sorbentning dastlabki quruq materialida (ion almashtirgich) qarama-qarshi ionlar har doim barcha ionlarning zaryadlarini neytrallashtiradigan miqdorda mavjud.
Harakatlanuvchi faza (eluent) har doim asosan suvli bo'ladi. Uning asosiy jismoniy parametrlari pH, konsentratsiya va erigan tuzlarning tabiati. Moddaning matritsa moddasi bilan o'ziga xos bo'lmagan o'zaro ta'sirini bostirish uchun eluentga karbamid va yuvish vositalarini qo'shish mumkin.
Fraksiyalangan moddalar har doim qandaydir elektr zaryadini olib yurishi yoki hech bo'lmaganda ionlash qobiliyatiga ega bo'lishi kerak.
Ular ko'proq yoki kamroq katta ionlar, zvitterionlar, ya'ni bo'lishi mumkin.umuman olganda, teng miqdordagi musbat va manfiy zaryadlarni o'z ichiga olgan neytral molekulalar yoki amfolitlar katta molekulalar bo'lib, ularning yuzasida zaryadlanishi mumkin bo'lgan bir nechta ionogen guruhlar mavjud va eluentning pH darajasiga qarab, u yoki bu mozaika hosil qiladi. ikkala belgining elektr zaryadlari.
Xromatografik jarayonning borishi, har doimgidek, birinchi navbatda, moddalarning xromatografik aralashmasining har bir komponenti uchun statsionar va harakatlanuvchi fazalar o'rtasidagi muvozanat taqsimot koeffitsientlari (K) qiymatlari bilan belgilanadi. Moddaning fazalar o'rtasida taqsimlanishi modda molekulasidagi ionlar yoki zaryadlangan guruhlarning ion almashinuvchining zaryadlangan guruhlari bilan elektrostatik o'zaro ta'sirining kuchiga bog'liq. Bu o'zaro ta'sir ham moddaning o'zi tabiati, ham u sodir bo'lgan suyuq muhitning xususiyatlari, xususan pH bilan belgilanadi.

Yuqori samarali suyuqlik kromatografiyasining xususiyatlari

Yuqori mahsuldor suyuq xromatografiya" to'rtta yuqori va bitta keng" ;:Igh Yuqori bosim:Ko'chma faza suyuqlikdir va u xromatografik kolonkadan o'tayotganda unga ko'proq qarshilik ko'rsatiladi. Xromatografik kolonkadan tezda o'tish uchun tashuvchi suyuqlikka yuqori bosim tushishi kerak.
IghYuqori tezlik:Tahlil tezligi tez va tashuvchi suyuqlik oqimi tezroq. Bu klassik suyuqlik xromatografiyasidan ancha tezroq. Odatda namunani tahlil qilish uchun 15 dan 30 minutgacha vaqt ketadi. Ba'zi namunalarni hatto 5 daqiqada, umuman 1 soatdan kamroq vaqt ichida to'ldirish mumkin.
IghYuqori samaradorlik:Ajratishning yuqori samaradorligi. Eng yaxshi ajratish effektiga erishish uchun statsionar faza va harakatlanuvchi fazani tanlash mumkin, bu sanoat rektifikatsiya minoralari va gaz xromatografiyasining ajratish samaradorligidan bir necha baravar yuqori.
④Yuksak sezgirlik:UV detektori 0,01ng ga yetishi mumkin va in'ektsiya hajmi mL tartibida bo'ladi.
⑤Ilovalarning keng doirasi:Organik birikmalarning 70% dan ko'prog'ini yuqori mahsuldorlikdagi suyuq xromatografiya, ayniqsa yuqori qaynash harorati, katta molekula, kuchli kutupluluk, yomon barqarorlik birikmalarining afzalliklarini ajratish tahlili bilan tahlil qilish mumkin.
⑥Ustundan bir necha marta foydalanish mumkin:Turli xil birikmalarni bitta ustun bilan ajrating
⑦ Qayta ishlashga yaroqli kichik miqdordagi namuna:
Namuna xromatografik ustundan o'tganidan keyin yo'q qilinmaydi va bitta komponentni yig'ish yoki tayyorlash mumkin.
Bundan tashqari, HPLC xromatografik ustunni takroran ishlatish, shikastlanmagan namunalar va oson tiklanishning afzalliklariga ega, ammo uning kamchiliklari ham mavjud. Gaz xromatografiyasi bilan taqqoslaganda, ularning har biri o'ziga xos afzalliklarga ega va bir-birini to'ldiradi. Yuqori mahsuldor suyuqlik kromatografiyasining kamchiligi" ustunli effekt". Namuna va detektor orasidagi har qanday o'lik bo'shliqda (injektor, kolonka armaturalari, tutashtiruvchi trubka, aniqlash xujayrasi va boshqalar), kolonnadan tashqari, agar mobil fazaning oqim sxemasi o'zgarsa, har qanday diffuziya va ushlab turish sezilarli darajada kengayishga olib keladi. kromatografik cho'qqilar va ustun samaradorligining pastligi. Yuqori mahsuldorlikdagi suyuq xromatografiya detektorlarining sezgirligi gaz xromatografiyasidek yaxshi emas.