Xxiv международная медико-биологическая конференция молодых исследователей Фундаментальная наука и клиническая

НОБИЛЕТИН ИНГИБИРУЕТ ТРОМБОЦИТЫ 
ПУТЕМ АКТИВАЦИИ РЕЦЕПТОРА DP1
Прилепская А.М., студ.
1
, Авдеева А.В., магистрант
1
, 
Шпакова В.С., асп.
2
1
Санкт-Петербургский государственный университет,
2
Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова, 
Санкт-Петербург, Россия
Научный руководитель: Гамбарян С.П., д.б.н., проф., г.н.с. 
Введение. 
Заболевания, связанные с нарушением функциониро-
вания тромбоцитов, являются одной из главных причин смертно-
сти в мире. Современная терапия тромбозов эффективна, однако не 
исключает риск развития побочных эффектов. В связи с этим ак-
туален поиск новых анитромбоцитарных препаратов. Перспектив-
ным является изучение соединений растительного происхождения,
в частности флавоноидов, характеризующихся низкой токсично-
стью и широким спектром биологических активностей. Нобилетин 
представляет собой полиметоксилированный флавон группы фла-
воноидов, выделенный из кожуры цитрусовых и обладающий мно-
жеством полезных свойств. Известно, что нобилетин блокирует ак-
тивность тромбоцитов, однако точные механизмы его действия не 
известны.
Цель исследования. 
Изучение механизмов действия нобилетина 
на функциональное состояние тромбоцитов. 
Материалы и методы. 
Исследование проводилось на тромбо-
цитах человека, выделенных из крови здоровых доноров. Для опре-
деления степени активации интегринов альфаIIbбета3, а также для 
оценки экстернализации PS (фосфатидилсерина) использовали ме-
тод проточной цитометрии. Western Blot анализ применялся для 
определения фосфорилирования белка VASP (вазодилататор-сти-
мулированный фосфопротеин) и активации каспазы 3. 
Результаты.
Нобилетин дозозависимо (от 25-75 мкМ) ингибиро-
вал активацию интегринов альфаIIbбета3, стимулированную тром-
бином или CRP. Нобилетин не вызывал экстернализацию PS или 
активацию каспазы-3, следовательно, ингибирующий эффект не свя-

---

ФАРМАКОЛОГИЯ, ФАРМАКОГНОЗИЯ, ФАРМАЦЕВТИКА, ТОКСИКОЛОГИЯ
767
зан с запуском апоптоза в тромбоцитах. Главными ингибирующими 
системами в тромбоцитах являются активируемые циклическими 
нуклеотидами протеинкиназы A и G (PKA и PKG). Активность этих 
киназ можно измерить по фосфорилированию субстратного белка 
VASP. Нобилетин вызывал фосфорилирование VASP через 1 минуту 
после введения. Фосфорилирование VASP блокировалось ингибито-
ром аденилат- (AC), но не гуанилатциклазы (GC). Мы предположи-
ли, что стимуляция AC/cAMP/PKA системы нобилетином в данном 
случае может быть опосредована активацией поверхностных рецеп-
торов. Мы проверили ингибиторы (ZM241385, BWA868C, CAY10441 
и L161982) к рецепторам A2A, DP1, IP и PGE2, которые активируют 
AC в тромбоцитах. Фосфорилирование VASP блокировалось только 
при ингибировании рецептора DP1.
Выводы.
Нобилетин ингибирует тромбоциты путем активации 
рецептора DP1, опосредующего активацию AC/cAMP/PKA системы. 
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рам-
ках научного проекта № 19-315-90102.

---

768
ФАРМАКОЛОГИЯ, ФАРМАКОГНОЗИЯ, ФАРМАЦЕВТИКА, ТОКСИКОЛОГИЯ