НОБИЛЕТИН ИНГИБИРУЕТ ТРОМБОЦИТЫ
ПУТЕМ АКТИВАЦИИ РЕЦЕПТОРА DP1
Прилепская А.М., студ.
1
, Авдеева А.В., магистрант
1
,
Шпакова В.С., асп.
2
1
Санкт-Петербургский государственный университет,
2
Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова,
Санкт-Петербург, Россия
Научный руководитель: Гамбарян С.П., д.б.н., проф., г.н.с.
Введение.
Заболевания, связанные с нарушением функциониро-
вания тромбоцитов, являются одной из главных причин смертно-
сти в мире. Современная терапия тромбозов эффективна, однако не
исключает риск развития побочных эффектов. В связи с этим ак-
туален поиск новых анитромбоцитарных препаратов. Перспектив-
ным является изучение соединений растительного происхождения,
в частности флавоноидов, характеризующихся низкой токсично-
стью и широким спектром биологических активностей. Нобилетин
представляет собой полиметоксилированный флавон группы фла-
воноидов, выделенный из кожуры цитрусовых и обладающий мно-
жеством полезных свойств. Известно, что нобилетин блокирует ак-
тивность тромбоцитов, однако точные механизмы его действия не
известны.
Цель исследования.
Изучение механизмов действия нобилетина
на функциональное состояние тромбоцитов.
Материалы и методы.
Исследование проводилось на тромбо-
цитах человека, выделенных из крови здоровых доноров. Для опре-
деления степени активации интегринов альфаIIbбета3, а также для
оценки экстернализации PS (фосфатидилсерина) использовали ме-
тод проточной цитометрии. Western Blot анализ применялся для
определения фосфорилирования белка VASP (вазодилататор-сти-
мулированный фосфопротеин) и активации каспазы 3.
Результаты.
Нобилетин дозозависимо (от 25-75 мкМ) ингибиро-
вал активацию интегринов альфаIIbбета3, стимулированную тром-
бином или CRP. Нобилетин не вызывал экстернализацию PS или
активацию каспазы-3, следовательно, ингибирующий эффект не свя-
ФАРМАКОЛОГИЯ, ФАРМАКОГНОЗИЯ, ФАРМАЦЕВТИКА, ТОКСИКОЛОГИЯ
767
зан с запуском апоптоза в тромбоцитах. Главными ингибирующими
системами в тромбоцитах являются активируемые циклическими
нуклеотидами протеинкиназы A и G (PKA и PKG). Активность этих
киназ можно измерить по фосфорилированию субстратного белка
VASP. Нобилетин вызывал фосфорилирование VASP через 1 минуту
после введения. Фосфорилирование VASP блокировалось ингибито-
ром аденилат- (AC), но не гуанилатциклазы (GC). Мы предположи-
ли, что стимуляция AC/cAMP/PKA системы нобилетином в данном
случае может быть опосредована активацией поверхностных рецеп-
торов. Мы проверили ингибиторы (ZM241385, BWA868C, CAY10441
и L161982) к рецепторам A2A, DP1, IP и PGE2, которые активируют
AC в тромбоцитах. Фосфорилирование VASP блокировалось только
при ингибировании рецептора DP1.
Выводы.
Нобилетин ингибирует тромбоциты путем активации
рецептора DP1, опосредующего активацию AC/cAMP/PKA системы.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рам-
ках научного проекта № 19-315-90102.
768
ФАРМАКОЛОГИЯ, ФАРМАКОГНОЗИЯ, ФАРМАЦЕВТИКА, ТОКСИКОЛОГИЯ
Do'stlaringiz bilan baham: |