ПРОДУКЦИЯ АЛЬБУМИНА ТКАНЕИНЖЕНЕРНЫМИ
КОНСТРУКЦИЯМИ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ
Дубко А.Д., м.н.с., Свирская А.В., студ.
Международный государственный экологический институт
им. А.Д. Сахарова БГУ,
Минск, Республика Беларусь
Научный руководитель: Зафранская М.М., д.м.н., доц.
При создании тканеинженерных конструкций (ТИК) печени ос-
новной задачей является достижение их функциональной состоя-
тельности.
Цель исследования:
оценка продукции альбумина ТИК, на ос-
нове скаффолда печени крысы и многокомпонентных аллогенных
клеточных культур.
При разработке ТИК использованы образцы долей скаффолда
печени, полученные путем перфузионной децеллюляризации 0,1%
раствором додецилсульфата натрия. Сборку ТИК проводили путем
инъекции суспензии клеточных культур после установления объ-
ема каждого образца в следующих концентрациях: мультипотент-
ные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) — 2,5х10
5
кл/
см
3
, гепатоциты — 2,5х10
6
кл/см
3
, макрофаги — 7,5х10
5
кл/см
3
. Для
оценки синтезирующей функции использовано 4 варианта ТИК:
1 — культура гепатоцитов; 2 — подложка из ММСК и культура ге-
патоцитов; 3 — кокультура гепатоцитов и перитонеальных макро-
фагов; 4 — подложка из ММСК и кокультура гепатоцитов и пери-
тонеальных макрофагов. Конструкции культивировали в течение
6 суток при 37°С и 5% СО
2
, в среде DMEM. Определение концен-
трации альбумина проводили коммерческим набором Liquick Cor-
ALBUMIN 60 (PZ CORMAY S.A.) на 1, 3, 6 сутки культивирования.
В качестве контроля использованы монослойные культуры и ко-
культуры клеток соответствующего состава без скаффолда.
После введения в образцы скаффолда клеточного компонента,
клеточный выход составил 18,3±0,9% для всех вариантов конструк-
ций и статистически значимо не различался. На первые сутки куль-
тивирования наибольшая продукция альбумина наблюдалась в ТИК
ФИЗИОЛОГИЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА
835
2-го (19,6±0,3 мг/млн кл/сут) и 3-го (21,1±0,4 мг/млн кл/сут) вариан-
тов сборки, превышая в более чем 7 раз продукцию в ТИК варианта
1 (2,8±0,2 мг/млн кл/сут) и в 12 раз продукцию монослойной куль-
туры гепатоцитов (1,6±0,3 мг/млн кл/сут). Однако, во всех образцах
наблюдалось снижение продукции альбумина к 6-му дню культи-
вирования: для 1 варианта сборки до 0,4±0,1 мг/млн кл/сут, 2-го —
до 1,2±0,1 мг/млн кл/сут, 4-го — до 1,4±0,1 мг/млн кл/сут, в 3 вариан-
те продукция отсутствовала.
Таким образом, через 24 часа культивирования ТИК второго
и третьего вариантов сборки, обладали наибольшей способностью
к продукции альбумина. Дальнейшее усовершенствование ТИК бу-
дет направленно на повышение стабильности продукции альбумина.
Работа выполнена при финансовой поддержке Белорусского респу-
бликанского фонда фундаментальных исследований в рамках гранта
№M19APM-016 от 02.05.2019.
836
ФИЗИОЛОГИЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА
Do'stlaringiz bilan baham: |