ВЛИЯНИЕ ГИСТАМИНА НА ЭКСПРЕССИЮ
β-ДЕФЕНЗИНА-1 В НЕРВНЫХ СПЛЕТЕНИЯХ
И ТКАНЯХ КИШКИ КРЫСЫ
Платонова О.Н., м.н.с., Дворникова К.А., м.н.с.
Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН,
Санкт-Петербург, Россия
Научный руководители: Быстрова Е.Ю., к.б.н.
Изучение сигнальных путей и их отдельных компонентов, вовле-
ченных в иммунные ответы, врожденные и адаптивные, занимает
в настоящее время важнейшую роль в фундаментальных и меди-
цинских исследованиях. Эндогенные антимикробные пептиды
(АМП), такие как β-дефензин-1 (бета дефензин 1, BD1) участвуют в
противоинфекционной защите. Так, например, важнейшей задачей
для разработки терапевтических подходов к лечению воспалитель-
ных заболеваний кишечника, таких как Болезнь Крона и язвенный
колит, является понимание механизмов, в которые вовлечены АМП.
Гистамин является широко встречаемым в организме человека ме-
диатором, при этом рецепторы к нему встречаются не только на
иммунных клетках, но и на нейронах энтеральной нервной системы
(ЭНС), гладкомышечных, эндотелиальных и эпителиальных клет-
ках. Широкое поле иммуномодулирующих эффектов гистамина за-
дает вопрос о возможностях модуляции экспрессии АМП, в частно-
сти, бета-дефензина в норме и на моделях эндотоксемии.
Цель исследования
заключалась в определении экспрессии пеп-
тидов β-дефензина-1 (rBD1) в тканях ободочной кишки крысы с по-
мощью иммунофлуоресцентной микроскопии в норме и на модели
бактериальной эндотоксемии, индуцируемой липополисахаридом
(ЛПС) Escherichia coli.
Результаты.
С помощью иммуногистохимического метода с двой-
ной меткой мы идентифицировали АМП (антитела к rBD1, Santa
Cruz Biotechnology) а также нейроны и сплетения ЭНС (антитела
к UCHL1, Sigma-Aldrich). Снимки, полученные с помощью конфо-
кального лазерного сканирующего микроскопа LSM 710 фирмы Carl
Zeiss, Германия (Центр коллективного пользования «Конфокальная
ФИЗИОЛОГИЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА
831
микроскопия» ИФ РАН) анализировали с применением программ-
ного обеспечения ImageJ, оценивая интенсивность флуоресценции.
Статистическую обработку результатов проводили с помощью про-
граммы Statistica 10.0.
Нами было установлено, что гистамин статистически значимо
увеличивал экспрессию rBD1 не только в тканях кишки, но и на ней-
ронах межмышечного и подслизистого сплетений. Бактериальная
эндотоксемия приводит к увеличению экспрессию rBD1 через 6 ч,
при действии гистамина уровни повышаются. При этом супрастин
подавляет эффекты от ЛПС-индуцированного воспаления как при
воздействии, так и в отсутствие гистамина.
Заключение.
Обнаруженная нами дифференциальная экспрес-
сия антимикробного пептида rBD1 предполагает, что модулирую-
щее действие гистамина в патологических процессах может играть
важнейшую роль в разработке терапевтических подходов к лечению
воспалительных заболеваний кишечника.
832
ФИЗИОЛОГИЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА
Do'stlaringiz bilan baham: |