Учебное пособие по курсу «Медицинская биохимия» /Л. А. Ганеева, Л. И. Зайнуллин

Работа 4. Диализ солевого раствора белка 
Метод диализа основан на способности низкомолекулярных веществ 
диффузно­ проникать через полупроницаемые мембраны, а макромолекул — 
не проникать­. Белки, являясь высокомолекулярными коллоидными вещества-
ми, не диффундируют через полупроницаемые мембраны (например, 
коллоди-евую или целлофановую пленки). Это свойство белков лежит в 
основе очистки их от низкомолекулярных­ примесей. 
Ход работы: 
Вначале с помощью биуретовой реакции
 
(см.
 
работу
 
1)
 
опре­
 
деляют, содержит ли исследуемый раствор белок. 
Целлофановый мешочек наполняют на одну треть объема 1 % раствором 
исследуемого­ белка. Мешочек помещают в диализатор, заполненный дистил­ 
лированной водой, зажимая у верхнего края двумя стеклянными палочками, 
29 

---

которые­ скреплены резиновыми колечками. Через 48 часов с диализатом (на-
ружная жидкость) и используемой для диализа дистиллированной водой про-
водят реакцию­ на обнаружение хлоридов. Готовят две пробирки, в одну из них 
наливают 1 мл диализата, в другую — 1 мл дистиллированной воды, затем по 1 
капле 10 % раствора азотной кислоты и 1 % раствора нитрата серебра. В про-
бирке, содержащей­ диализат, выпадает белый осадок, а в пробирке с дистилли-
рованной водой осадка нет. Делают вывод о том, что при диализе солевого рас-
твора белка хлориды­ проникли в диализат через полупроницаемую мембрану. 
Для проверки содержания белка в одну пробирку наливают 3 мл 
диализата, в другую — 3 мл диализируемой жидкости, затем в обе пробирки 
добавляют по 1 мл 10 % раствора гидроксида натрия и по 1–2 капли 1 % 
раствора сульфа-та меди (проводят биуретовую реакцию). По изменению 
окраски в пробирке с диализируемой­ жидкостью делают вывод о том, что 
белок не проникает через полупроницаемую­ мембрану.