Глава 2. Методология химико-токсикологического анализа
____________________________________________________________________________
Величина рН зависит от получаемой пищи (при белковой диете рН
снижается, при растительной – повышается), от физической нагрузки
(при повышенной нагрузке моча становится кислой), от принимаемых
лекарственных
средств,
патологических
процессов
(при
гипервентиляции, гипокалиемии происходит подщелачивание мочи, а
при голодании, тяжелой диспепсии, ацидозе, напротив, отмечается
кислая реакция). При определении лекарственных веществ необходимо
контролировать рН мочи, а во многих случаях целесообразно менять
величину рН для проведения анализа в стандартных условиях,
например, подщелачивая пробу или добавляя к ней буферный раствор с
большой буферной емкостью.
Эндогенные вещества, растворенные в моче, могут затруднять
проведение химико-токсикологического анализа. Минеральные соли и
мочевина загрязняют колонки при использовании методов
газожидкостной хроматографии. Некоторые эндогенные вещества в
моче поглощают свет в ультрафиолетовой области, осложняя прямое
применение
спектрофотометрического
метода
определения
концентрации токсиканта в моче. Поэтому перед проведением
количественного определения токсикантов в большинстве случаев
пробу предварительно обрабатывают.
Моча часто, особенно при патологических процессах, содержит
взвешенные частицы, от которых обычно избавляются фильтрацией
через плотный фильтр или центрифугированием. Белки, если они есть в
моче и могут мешать анализу, осаждают и отделяют теми же методами
и с теми же предосторожностями, что и в случае обработки сыворотки
крови.
От большей части минеральных солей можно освободить мочу
пропусканием образца через колонку с ионообменной смолой. Один из
самых распространенных методов обработки мочи при определении
липофильных
веществ
является
экстракция
органическими
растворителями, не смешивающимися с водой. В большинстве случаев
добиваются возможно более полного перевода определяемого вещества
в органическую фазу, а соли, мочевина, мочевая кислота,
аминокислоты, глюкурониды и другие гидрофильные вещества
остаются в основном в водной фазе. Необходимо проводить
экстракцию всех образцов (исследуемых и контрольных) в строго
одинаковых условиях по всем параметрам.
Многие гидрофильные вещества невозможно достаточно полно
экстрагировать из пробы мочи. Эта проблема особенно остро встает
при определении метаболитов многих лекарственных веществ,
поскольку при биотрансформации полярность молекул лекарственных
веществ обычно резко увеличивается – вводятся гидроксильные
группы, образуются N- и S-оксиды, происходит конъюгация с такими
44
Do'stlaringiz bilan baham: |