Учебное пособие / А. И. Жебентяев. Витебск: вгму,2014

Глава 2. Методология химико-токсикологического анализа 
____________________________________________________________________________ 
полярными группировками, как остатки глюкуроновой и серной 
кислот и т.д. Обработка проб при анализе таких полярных соединений 
зависит от применяемого аналитического метода. 
Наиболее пригодными в этом случае являются методы, 
позволяющие проводить исследования в водной или водно-
органической фазе. К ним, в первую очередь, можно отнести 
высокоэффективную 
жидкостную 
хроматографию, 
а 
также 
полярографию, спектрофотометрию, иммунохимические методы и 
некоторые другие. При анализе этими методами можно избежать 
экстракции анализируемых веществ из мочи. При исследовании 
другими методами (газожидкостная и тонкослойная хроматография, 
адсорбционная жидкостная хроматография с использованием 
несмешивающихся с водой элюентов и др.), когда использование 
водных растворов невозможно или нежелательно, применяют особые 
методы перевода анализируемого вещества из мочи в органический 
растворитель. Если подлежащее исследованию вещество растворимо в 
одном из гидрофильных растворителей (метанол, этанол, ацетон,
диметилформамид, диметилсульфоксид, пиридин), то можно удалить 
из пробы мочи воду и из сухого остатка извлечь анализируемое 
вещество или метаболит таким растворителем. При этом удается в 
значительной мере избавиться от минеральных солей, белков и 
некоторых других веществ, слаборастворимых в выбранном 
растворителе. Удаление воды из образцов мочи проводят упариванием 
при небольшом нагревании ( 40 
) в вакууме с применением 
роторного испарителя, а лучше – лиофильной сушкой замороженного 
образца. 
Другим методом обработки может быть химическая 
трансформация определяемого вещества (метаболита) с образованием 
вещества, которое можно извлечь жидкостной экстракцией. Это в 
первую очередь относится к определению некоторых конъюгатов 
(глюкурониды, сульфаты и др.). Гидролиз конъюгатов можно 
проводить нагреванием с кислотами (соляная, серная). Однако такая 
жесткая обработка может привести не только к ожидаемому гидролизу, 
но и более глубокой деструкции определяемого вещества, и поэтому 
кислотный гидролиз имеет ограниченное применение – лишь для 
термо- и кислотоустойчивых веществ. Более универсальным является 
ферментативный гидролиз с применением глюкуронидазы и 
сульфатазы, причем часто используется смесь ферментов для 
одновременного гидролиза сульфатной и глюкуронильной группы. В 
последние годы ферментативный гидролиз конъюгатов почти 
полностью вытеснил кислотную обработку проб. 
Для переведения исследуемых веществ в удобную для 
определения 
форму 
применяют 
также 
препаративные 
45 

---