Учебное пособие / А. И. Жебентяев. Витебск: вгму,2014

Глава 2. Методология химико-токсикологического анализа 
____________________________________________________________________________ 
эритроцитах). Наиболее удовлетворительным следует считать анализ 
сыворотки или плазмы крови. 
Большая часть лекарственных веществ не связывается в 
значительной степени с фибрином, поэтому результаты анализа 
сыворотки и плазмы оказываются практически одинаковыми. Для 
определения таких веществ удобнее работать с сывороткой крови. 
Как известно, получение устойчивых в отношении свертывания 
образцов плазмы крови требует добавления к пробе антикоагулянтов. 
Обычно применяются гепарин, агенты, связывающие ионы кальция, 
ЭДТА, соли лимонной кислоты (цитраты) или фтороводородной 
кислоты (фториды). Добавление растворов этих веществ создает ряд 
методических проблем: необходимо учитывать разбавление образца, 
особенно при малых объемах крови, взятой, например, из пальца; 
добавленные реагенты могут оказывать влияние на результаты 
анализов. Фториды могут служить также в качестве консервантов 
плазмы, в частности, фторид-ионы ингибируют сывороточную 
холинэстеразу, которая при хранении образцов плазмы может 
гидролизовать некоторые лекарственные вещества (например, кокаин, 
ацетилсалициловую кислоту, новокаин). 
Многие лекарственные вещества связываются (иногда на 90% и 
более) с белками сыворотки крови, в основном с альбумином, реже – с 
глобулинами. В то же время большинство методов определяет общую 
концентрацию в виде суммы связанного и несвязанного с белками 
лекарственного вещества в крови (плазме, сыворотке). Для веществ 
слабо связанных (до 30%) с белками суммарная концентрация в 
сыворотке близка к уровню свободного вещества. 
При использовании большинства методов обработки образцов 
сыворотки или плазмы создаются условия для разрушения комплекса 
определяемого вещества с белками и в результате определяется общее 
количество препарата (метаболита) в образце. Необходимо, чтобы 
высвобождение вещества из комплекса было либо полным, либо 
постоянным от опыта к опыту. Все операции по обработке проб 
должны проводиться в строго одинаковых условиях для всех 
стандартных (контрольных) и анализируемых проб. Одинаковым 
должно быть время и интенсивность перемешивания фаз при 
экстракции из сыворотки (плазмы), объем пробы и экстрагента, рН 
водной фазы, чистота экстрагирующего растворителя и даже объем и 
форма сосуда, в котором проводится процесс экстракции. Такие 
требования строгой стандартности условий относятся и к другим 
процессам обработки образцов – центрифугированию, процессам 
дериватизации и т.д. 
В ряде методов анализ проводится в так называемом 
безбелковом фильтрате крови или других тканей, т.е. после осаждения 
41 

---