Учебное пособие / А. И. Жебентяев. Витебск: вгму,2014

Глава 10. Вещества, определяемые непосредственно
в биологическом материале 
Рис. 10.2.Спектры поглощения карбоксигемоглобина (1) и 
дезоксигемоглобина (2). 
Известны и другие методики спектрофотометрического 
определения карбоксигемоглобина в крови. Например, методика 
спектрофотометрического определения карбоксигемоглобина в крови, 
основанная на измерении оптической плотности трех растворов (А, В 
и С) исследуемой крови (второй и третий растворы насыщают 
монооксидом углерода и кислородом до 100% содержания 
карбоксигемоглобина и оксигемоглобина соответственно). Затем 
растворы обрабатывают дитионитом натрия и измеряют оптические 
плотности при 540 и 579 нм (изобестическая точка). Рассчитывают 
отношение А
540 
и А
579 
для трех растворов и полученные значения 
подставляют в формулу для расчета содержания карбоксигемоглобина 
в крови:
100
R
R
R
R
%
HbCO,
C
B
С
A
⋅
−
−
=
(10.6) 
где R
A
, R
B
, R
C 
– 
отношение оптических плотностей при 540 и 579 
нм для растворов А, В и С.
372 

---

Глава 10. Вещества, определяемые непосредственно
в биологическом материале 
Газохроматографическое определение монооксида углерода 
Сущность газохроматографического определения монооксида 
углерода состоит в том, что содержащийся в крови 
карбоксигемоглобин разрушается под воздействием серной кислоты, и 
монооксид углерода переходит в парогазовую фазу, которую вводят в 
хроматографическую колонку. В хроматографической колонке 
разделенные компоненты смеси поступают в детектор по 
теплопроводности. Хроматографические пики идентифицируют путем 
сравнения параметров удерживания с табличными параметрами, 
полученными при анализе модельных смесей. 
Условия газохроматографического анализа: температура 
термостата колонки – 80 ºС, температура инжектора – 100 ºС, 
температура детектора по теплопроводности – 140 ºС, объем вводимой 
пробы – 0,2–1,0 см
3 
(в зависимости от модели хроматографа), расход 
гелия через колонку – 30–40 см
3
/мин, ориентировочное время 
удерживания кислорода – 83 с, азота – 114 с, монооксида углерода – 
240 с. 
Газохроматографическое исследование крови проводится в том 
случае, если по результатам спектрофометрического определения 
монооксида углерода в крови получено 20% и более, а результаты 
химических реакций сомнительные или отрицательные. 
Предложены и другие методики хроматографического 
определения монооксида углерода (Сотников Е.Е., 1971): кровь, 
содержащую монооксид углерода, нагревают, парогазовую фазу вводят 
в хроматограф. Монооксид углерода в присутствии катализатора 
(никель) восстанавливается до метана, который регистрирует 
пламенно-ионизационный детектор. 
Разработана методика газохроматографического определения СО 
в крови, основанная на адсорбции ее серебряными формами цеолита. 
При нагревании цеолита сорбированный СО десорбируется и 
определяется методом газовой хроматографии (детектор по 
теплопроводности). Сравнение со спектрофотометрическим методом 
дало хорошее совпадение результатов. 
Судебно-медицинская оценка результатов количественного 
определения карбоксигемоглобина. 
Наиболее надежным диагностическим признаком отравления СО 
являются результаты судебно-химического исследования. 
Физиологическая норма содержания СOHb в крови – 1,5–3%, 
верхняя граница нормы – 10%. 
10–20% 
– 
легкая головная боль, расширение кожных 
кровеносных сосудов; 
20–30% – 
головная боль, ощущение пульса в висках; 
373 

---