Учебное пособие / А. И. Жебентяев. Витебск: вгму,2014

Глава 10. Вещества, определяемые непосредственно
в биологическом материале 
Измерение оптической плотности приготовленного раствора В 
проводят в кювете спектрометра с толщиной слоя жидкости 1 см при 
длине волны 538 нм. Аналитические длины волн 538 и 550 нм выбраны 
в соответствии со спектрами поглощения карбоксигемоглобина и 
дезоксигемоглобина (рис. 10.2). 
При длинах волн 550, 565 и 580 нм наблюдаются три 
изобестические точки (оптические плотности одинаковые). Длина 
волны 538 нм соответствует наибольшей разнице значений оптических 
плотностей растворов карбоксигемоглобина и дезоксигемоглобина. 
Расчет содержания карбоксигемоглобина в исследуемой крови в 
процентах проводят по формуле: 
К
А
100
)
А
(А
100
%
HbCO,
2
1
3
⋅
⋅
−
−
=
(10.4) 
где А
3
– 
оптическая плотность раствора В крови при 538 нм; А
2 
– 
оптическая плотность раствора А крови при 550 нм; А
1
– 
оптическая 
плотность раствора А крови при 538 нм; К – коэффициент 0,372. 
Коэффициент (К) может иметь другие значения, если максимумы 
спектров поглощения дезокси- и карбоксипроизводных гемоглобина не 
будут 
совпадать 
с 
максимумами 
спектров 
поглощения 
карбоксигемоглобина (541, 571 нм) и дезоксигемоглобина (557 нм). В 
этом случае расчет коэффициента (К) проводят по формуле: 
(10.5) 
где А
HbCO
– 
оптическая плотность раствора крови, дополнительно 
насыщенного монооксидом углерода; А
Hb
И
– 
оптическая плотность 
раствора крови в изобестической точке; А
Hb
– 
оптическая плотность 
раствора крови, обработанного дитионитом натрия, содержащего 
дезоксигемоглобин. Для определения коэффициента К берут 
донорскую кровь, которая не подвергалась воздействию монооксида 
углерода. 
HbИ
Hb
HbCO
А
А
А
К
−
=
371 

---