Учебно-методический комплекс ферганский филиал узбекского государственного университета физической культуры и спорта

Оборудование: водяная баня, штатив для пробирок, пипетки, пробирки.
Растворы: 0,1%-растворглицина, гидролизат белка, спиртовый раствор нингидрина – 0,1%.
Ход работы:

1. 
   В пробирку наливают 1 мл раствора глицина, добавляют 5-6 капель раствора нингидрина и нагревают. Появляется фиолетово-синее окрашивание.
   
2. 
   В пробирку наливают 2 мл раствора белка, добавляют 0,5 мл раствора нингидрина и нагревают. Появляется фиолетовое окрашивание (иногда фиолетово-розовое), с течением времени раствор синеет.
   

Опыт – 3. Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты
Ксантопротеиновая реакция открывает наличие в белках циклических аминокислот – триптофана, фенилаланина, тирозина, содержащих в своем составе бензольное ядро. Большинство белков при нагревании с концентрированной азотной кислотой дает желтое окрашивание, переходящее в оранжевое при подщелачивании. Реакция обусловлена нитрированием бензольного кольца этих аминокислот с образованием нитросоединений желтого цвета. При взаимодействии азотной кислоты с тирозином реакция нитри-рования протекает по следующему уравнению:



тирозин динитротирозин

При подщелачивании возникает хиноидная структура, окрашенная в оранжевый цвет:

Хиноидная форма натриевая соль
динитротирозина динитротирозина


Оборудование: спиртовка, водяная баня, пипетки, пробирки.
Реактивы: раствор белка, концентрированная азотная кислота, 10% –раствор едкого натра.
Ход работы:
В пробирку наливают 1 мл раствора белка и прибавляют 5-6 капель концентрированной азотной кислоты. Пробирку осторожно нагревают. Появляется осадок, который при нагревании окрашивается в желтый цвет.
После охлаждения в пробирку наливают по каплям раствор едкого натра. Желтая окраска при подщелачивании переходит в оранжевую.


Опыт – 4. Реакция Фоля на серосодержащие аминокислоты (цистеин, метионин)
Реакция Фоля указывает на присутствие в белке аминокислот цистина и цистеина. При кипячении белка со щелочью образуется сернистый натрий, который со свинцом дает черный или бурый осадок сернистого свинца.
1. CH₂ – SH CH₂ - OH


CH - NH₂ + 2NaOH СН - NH₂ +Na₂S + 2H₂O

COOH COOH

цистеинсерин

2. Na₂ S + Na₂ PвО₂ + 2Н₂ О → РвS + 4 NaOH