SIFATLI TAHLIL Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi sohasida ish boshlagan xromatograf sifat tahlilining asoslarini yaxshi bilishi kerak. Sifat tahlili yangi usulda olingan yoki boshqa mahsulotlar bilan aralashtirilgan ma’lum mahsulotni aniqlash uchun qo‘llaniladi.ayrim dorivor kimyoviy mahsulotlar va ularning bioml.teriallardagi metabolitlari... „.“Sifat asoslari bilan tanishish” tahlili umumiy ko‘rinishlarning oldini olishga yordam beradi. xatolar, masalan / namunadagi aralashmalarni erituvchidagi aralashmalardan ajratish yoki moddaning tozaligini bir nechta to'lqin uzunligi spektrofotometrida tekshirish, lekin har xilda va hokazo.
Tahlilni davom ettirishdan oldin, butun namuna ushbu erituvchi tizim tomonidan ustundan elutsiyalangan yoki yo'qligini aniqlash kerak. To'liq elyusiyaga ishonch hosil qilish uchun ustundan oqayotgan barcha suyuqlikni to'plash, erituvchini bug'lantirish, qoldiqni tortish va namunaning tiklanishini topish kerak.
HPLC komponentlarini identifikatsiyalash uchta usulda amalga oshirilishi mumkin: 1) saqlash ma'lumotlaridan foydalanish; 2) spektral yoki kimyoviy tahlil usullaridan foydalangan holda suyuq xromatograf ustunida ajratish yo'li bilan olingan zonalarni tekshirish; 3) spektr analizatorini to'g'ridan-to'g'ri ustunga ulang.
Saqlash hajmi xromatografiyada tepaliklarni qayd qilish uchun ishlatiladi V R yoki ushlab turish vaqti t R. Ikkala qiymat ham ma'lum bir xromatografik tizimdagi moddaning xarakteristikasidir. Ajraladigan moddani ushlab turish vaqti ustundagi o'zaro ta'sir qilish vaqti va trubaning bo'sh bo'limlari orqali o'tish vaqtidan iborat bo'lganligi sababli, u asbobdan asbobga farq qiladi. Ushbu ustunda saqlanmagan moddaga ega bo'lish qulay, uni standart sifatida qabul qilish, saqlash muddati va hajmi. t 0 , V o. Moddaning va standartning xromatografiyasi bir xil sharoitlarda (bosim va oqim tezligi) amalga oshirilishi kerak. Saqlash ma'lumotlari bo'yicha identifikatsiyalashda namunalarda mavjud bo'lishi mumkin bo'lgan ma'lum individual moddalar bir xil xromatografik tizimda ajratiladi va ular uchun qiymatlar olinadi. t R. Ushbu qiymatlarni taqqoslash t R noma'lum cho'qqining saqlanish vaqti bilan ular bir-biriga to'g'ri kelishi mumkin, bu holda cho'qqilar bir xil moddaga mos kelishi mumkin yoki t R ma'lum modda mos kelmaydi t R noma'lum zona. Keyin qiymatlarni taxmin qilish hali ham mumkin t R ularning saqlanishini bevosita o'lchash uchun mavjud bo'lmagan moddalar. Keling, ikkala variantni ham ko'rib chiqaylik.
Birinchi holda, aniqki, namunani oldindan o'rganish, unda o'ziga xos moddalar mavjudligini taxmin qilish kerak. Oddiy aralashmalar bilan ishlaganda, namuna zonalari va ma'lum moddalarni ushlab turish darajasi mos keladimi yoki yo'qligini aniqlash oson, ya'ni qiymatlar. t B bir xil yoki boshqacha. Murakkab aralashmalar bo'lsa, bir vaqtning o'zida bir nechta moddalarni o'xshash qiymatlarga ega bo'lish mumkin. t R, va aslida xromatografik ajratish natijasida olingan zonalar bir-biriga yopishadi. Natijada, aniq qiymatlarni olish t R turli zonalar uchun imkonsiz bo'ladi. Identifikatsiyaning ishonchliligi o'lchamning oshishi, ajratish shartlarini diqqat bilan nazorat qilish, qiymatlarni takroriy o'lchash bilan ortadi. t R va topilgan qiymatlarni o'rtacha hisoblash. Bunday holda, ma'lum va noma'lum moddalarni xromatografik ajratish muqobil bo'lishi kerak. Murakkab aralashmalarni ajratganda, qiymat t R moddalar namunaning o'zi matritsasi ta'sirida o'zgarishi mumkin. Bunday ta'sir xromatogrammaning boshida va tepaliklar bir-biriga yopishganda mumkin; Yuqorida aytib o'tilganidek, zonani kuchaytirish ham mumkin.
Bunday hollarda standart namunaga 1:1 nisbatda qo'shilishi kerak.Agar moddalar bir xil bo'lsa, qiymat t R boshlang'ich material o'zgarmaydi va xromatogrammada faqat bitta tepalik olinadi. Agar tsiklik xromatografiya tizimiga ega qurilma mavjud bo'lsa, unda ishonchli identifikatsiya qilish uchun aralashmani ustun orqali bir necha marta o'tkazish maqsadga muvofiqdir.
Saqlash darajasi haqida ma'lumotni adabiyotda ham topish mumkin, ammo bu ma'lumotlarning qiymati cheklangan. Hatto bitta to'plamning ustunlari yomon takrorlanuvchanlikni ta'minlaganligi sababli, adabiy qiymatlar har doim ham haqiqiy qiymatga mos kelmaydi. t R ushbu ustunda. Adsorbsion xromatografiya uchun esa, bashorat qilish mumkin t R adabiyot ma'lumotlariga asoslanadi. Adabiy ma'nolardan foydalanish bilan bog'liq yana bir qiyinchilik t R, - Xromatografiya jurnalida chop etilgan bibliografik sharhlarda moddalar turlarining yangilangan indeksi mavjud bo'lsa-da, ularni maxsus adabiyotlarda topish qiyinligi.
Ikkinchi holda, ma'lum birikmalar va namuna zonalarini saqlash vaqtlari mos kelmasa, noma'lum komponentning saqlanish vaqtini taxmin qilish mumkin. 3D xromatografiyada struktura ma'lumotlariga asoslangan nisbiy ushlab turish bashoratlari juda ishonchli. Ular adsorbsiya, bo'linish xromatografiyasida va ayniqsa, kimyoviy bog'langan fazada ishlaganda kamroq aniqlikka ega. P ma'lum bo'lgan moddalarning ion va ion-juft xromatografiyasi uchun Ka faqat taxminiy qiymatlar mumkin tR. Nisbiy ushlab turish yoki *x qiymatini mutlaq qiymatlardan ko'ra taxmin qilish har doim osonroqdir. k". Nisbiy qiymatlar t R almashtirilgan alkil karboksilik kislotalar yoki benzol hosilalari kabi tegishli birikmalar yoki hosilalar uchun baholash osonroq.
Gomologlar yoki oligomerlarning izokratik ajralishi bilan ba'zida quyidagi naqsh kuzatiladi:
