Erkin yodni titrlash uchun sarf bo‘lgan giposulfit
miqdori asosida qon qandi miqdori topish haqida ma'lumot
Gipos
u
l-
fit
ning
ml
miq
dor
i
dor
i
0,00
0,01
0,02
0,03
0,04
0,05
0,06
0,07
0,08
0,09
0,0
0,385
0,382
0,379
0,376
0,373
0,370
0,367
0,364
0,361
0,358
0,1
0,355
0,352
0,350
0,348
0,345
0,343
0,341
0,338
0,336
0,333
0,2
0,331
0,329
0,327
0,325
0,323
0,321
0,318
0,316
0,314
0,312
0,3
0,310
0,308
0,306
0,304
0,302
0,300
0,298
0,296
0,294
0,292
0,4
0,290
0,288
0,286
0,284
0,282
0,280
0,278
0,276
0,274
0,272
0,5
0,270
0,268
0,266
0,264
0,262
0,260
0,259
0,257
0,255
0,253
0,6
0,251
0,249
0,247
0,245
0,243
0,241
0,240
0,238
0,236
0,234
0,7
0,232
0,230
0,228
0,226
0,224
0,222
0,221
0,219
0,217
0,215
0,8
0,213
0,211
0,209
0,208
0,206
0,204
0,202
0,200
0,199
0,197
0,9
0,195
0,193
0,191
0,190
0,188
0,186
0,184
0,182
0,181
0,179
1,0
0,177
0,175
0,173
0,172
0,170
0,168
0,166
0,164
0,163
0,161
1,1
0,159
0,157
0,155
0,154
0,152
0,150
0,148
0,146
0,145
0,143
1,2
0,141
0,139
0,138
0,136
0,134
0,132
0,131
0,129
0,127
0,125
1,3
0,124
0,122
0,120
0,119
0,117
0,115
0,113
0,111
0,110
0,108
1,4
0,106
0,104
0,102
0,101
0,099
0,097
0,095
0,093
0,092
0,090
1,5
0,088
0,086
0,084
0,083
0,081
0,079
0,077
0,075
0,074
0,072
1,6
0,070
0,068
0,066
0,065
0,063
0,061
0,059
0,057
0,056
0,054
1,7
0,052
0,050
0,048
0,047
0,045
0,043
0,041
0,039
0,038
0,036
1,8
0,034
0,032
0,031
0,029
0,027
0,025
0,024
0,022
0,020
0,019
1,9
0,017
0,015
0,014
0,012
0,010
0,008
0,007
0,005
0,003
0,002
Jadvalning chap tomonidagi birinchi ustunda giposulfitning butun va o‘nlar ham
tepasidagi gorizantal ustunda yuzlar soni ko‘rsatilgan. Jadvalning o‘rtasidagi raqamlar esa sarf
bo‘lgan giposulfitga tegishli qand miqdorini ko‘rsatadi.
Masalan, birinchi kolbachadagi suyuqlikni titrlash uchun sarf bo‘lgan giposulfit miqdori
1,31 ml bo‘lsin. Ikkinchi kolbadagi suyuqlikni titrlash uchun sarf bo‘lgan giposulfitning miqdori
1,38 ml bo‘lsin.
Qon solinmagan nazorat kolbachadagi suyuqlikni titrlash uchun sarf bo‘lgan giposulfit
miqdori 1,91 bo‘lsin.
Birinchi kolbadagi suyuqlikning qand miqdorini bilish uchun avval jadvalning chap
tomonidagi ustundan 1,3 tepadagi gorizantal ustundan 0,01 ni topib, ikkalasi to‘g‘ri shartli chiziq
bilan birlashtiriladi. Ikkala chiziqning birlashgan nuqtasi 0,122 raqamga duch keladi. Demak,
birinchi tajribada tekshirilgan 0,1 ml qonda 0,122 mg qand bor ekan. Xuddi shu xilda ikkinchi
tajribadagi qand miqdori topiladi. U 0,110 mg qandga, nazoratniki esa 0,015 mg qandga to‘g‘ri
keladi.
Parallel ravishda o‘tkaziladigan har ikkala tajribadan o‘rtachasi topiladi. Buning uchun
birinchi tajribada topilgan qand miqdorini ikkinchi tajribada topilgan qand miqdoriga qo‘shib,
chiqqan son ikkiga bo‘linadi.
0,122 + 0,110 = 0,232
0,232 : 2 = 0,116
Shu 0,116 mg dan kontrol tajribadagi qand miqdori 0,015 mg ni olganda 0,1 ml qondagi
qand miqdori chiqadi. 0,116 – 0,015 = 0,101 va so‘ngra qondagi glyukozaning foiz miqdori
topiladi.
0,1 ml qonda ------------- 0,101
100 ml qonda ------------- X
X = 100 x 0,101/0,1 = 101 mg %
Shunday qilib, bizning misolimizda qondagi qand miqdori 101 mg % ekan.
61-tajriba. Antron reaktivi bilan fotometrik usulda qondagi
qand miqdorini aniqlash
Glyukoza konsentrik sulfat kislotada erigan antron bilan ko‘k rang beradi. Rangning
intensivligi glyukoza konsentratsiyasiga bog‘liq.
Kerakli jihozlar va reaktivlar
: probirkalar, FEK apparati, voronkacha, maxsus
elektroforetik filtr qog‘oz, uch xlor atsetatning 2,5 % li eritmasi, natriy ishqorining 0,1 % li
eritmasi, antron reaktivi (0,3 g antron 100 ml konsentrlangan sulfat kislotada (sol. og‘ir 1,74)
eritiladi.
Ishning bajarilishi
Probirkaga 0,1 normal natriy ishqori eritmasidan 0,5 ml solinadi. Uning ustiga
mikropipetka bilan barmoqdan 0,1 ml qon olib qo‘shiladi. So‘ng uch xlor atsetatning 2,5 % li
eritmasidan 2 ml qo‘shiladi. Natijada qondagi oqsillar cho‘kadi va shundan keyin elektroforetik
qog‘oz orqali filtrlanadi yoki sentrifugalash ham mumkin.
Ikkinchi probirkaga filtratdan 1 ml solib, uning ustiga 6 ml antron reaktividan qo‘shib,
boshqa probirkaga quyii yo‘li bilan aralashtiriladi. Shundan keyin uni qaynab turgan suv
hammomiga 10 minut qo‘yiladi. Aytilgan vaqt o‘tgandan keyin uni suv hammomidan olib
sovitiladi. Shunda suyuqlik qandning konsentratsiyasiga muvofiq holda och yashil, ko‘k yashil
yoki ko‘k rangga bo‘yaladi.
Tajriba bilan bir vaqtda boshqa probirkada nazorat ham tayyorlanadi. Buning uchun 0,2
ml natriy ishqorining 0,1 normal eritmasi ustiga uch xlor atsetatning 2,5 % li eritmasidan 0,8 ml
va 8 ml antron reaktivi solib, bu ham boshqa probirkaga quyish yo‘li bilan aralashtiriladi. Keyin
10 minut suv hammomiga qo‘yiladi va uni olib sovitiladi. Shunda suyuqlik sariq rangli bo‘ladi.
Suyuqlikning rangi turg‘un bo‘lib, 5-6 soat davomida o‘zgarmaydi.
Shundan so‘ng tekshiriladigan suyuqlikni 1 sm sig‘imli kyuvetalardan biriga solib, uni
FEK ka joylashtiriladi. Xuddi shuningdek nazorat probirkasidagi suyuqlik ham FEK ka
qo‘yiladi. Keyin ularni qizil rangli filtr bilan fotometrlanadi.
Kalibrlangan jadval toza quritilgan (suvsiz) glyukoza eritmasi yordamida tayyorlanadi.
Quyida kalibrlash egri chizig‘ini misol tariqasida keltiramiz.
1-rasm. Kalibrlangan egri chiziq.
Do'stlaringiz bilan baham: |