Штамм Bacillus subtilis 12 В

Штамм Bacillus subtilis 12 В.
Штамм Bacillus subtilis 12 В-ДЕП выделен из компоста в Уфимском районе (Башкирия). Принадлежит к спорообразующим аэробным бактериям рода Bacillus.
Штамм депонирован 7.10.1999 г во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве, под номером Bacillus subtilis 12В-ДЕП. Местом хранения штамма определена коллекция микроорганизмов отдела пробиотиков и биологически активных препаратов (ВГНКИ ветпрепаратов).
БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ШТАММА
Бактерии представляют собой грам-положительные спорообразующие палочки. Не растут в анаэробных условиях, гидролизуют мочевину и крахмал, разжижают желатину. Дают положительную реакцию Фогес-Проскауэра. Сбраживают лактозу, глюкозу, сахарозу, маннит, мальтозу, слабо ферментирует сорбит, галактозу, арабинозу, рафинозу, не ферментирует дульцит. Бактерии не патогенны, характеризуются высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и устойчивостью к целому ряду антибиотиков.
БЕЗОПАСНОСТЬ ШТАММА
Культура штамма B. subtilis 12 В проверена на безвредность (вирулентность, токсичность и токсигенность).
Для исследования вирулентности штамм выращивали на мясо-пептонном агаре в течение 24 часов при температуре 37 С. Выросшую биомассу смывали 0,9 %-ным раствором натрия хлорида и готовили бактериальные суспензии с концентрацией клеток от 0,5 до 5,0 млрд/ на 1 гол. Полученные суспензии вводили белым беспородным мышам массой (161) г двумя способами: однократно внутрибрюшинно и пятикратно перорально (по одной дозе ежедневно в течение 5 дней).
Исследование показало, что все животные остались живыми и набирали вес быстрее, чем животные контрольной группы.
С целью более полного изучения безопасности штамма при пероральном введении, были испытаны высокие дозы штамма при разовом пероральном введении мышам. Установлено, что разовое введение per os высоких доз штамма - (10-20)х10⁹ кл/на 1 гол не приводит к снижению веса животных даже на первые сутки после введения, а в последующие дни вес животных увеличивается.
Для исследования токсичности штамм выращивали на мясопептонном агаре в течение 24 часов при 37 С, смывали 0,9 %-ным раствором хлорида натрия, готовили суспензию, содержащие от 1,0 до 5,0 млрд клеток в 1 мл, которые затем инактивировали прогреванием при 100 С в течение 1 часа. Суспензии вводили способами, описанными при изучении вирулентности.
Для изучения токсигенности штамм выращивали в течение 10 суток на мясо-пептонном бульоне при температуре 37 С. По истечении срока культуральную жидкость центрифугировали при 8000 об/мин в течение 30 мин. Для введения мышам использовали надосадочную жидкость. Контролем служила группа мышей, получавших стерильный мясо-пептонный бульон.
Наблюдения за животными проводили на протяжении 5 суток после окончания курса инъекций или перорального введения. В этот период все животные оставались активными, хорошо поедали пищевые рационы, прибавляли в весе, физиологические отправления и поведенческие реакции у них не изменялись. Полученные данные свидетельствуют о безопасности штамма.