Сборник содержит материалы научной мультиконференции «Биотех- нология медицине будущего»

Изменение синтеза стафилоксантинов у штаммов Staphylococcus Aureus 
Str 402 и Staphylococcus Aureus Str 515 под давлением вирулентного 
бакtериофага A515
Летарова М.А.
1
, Тычина Е. П.
4
, Корниенко М.В.
3
, Летаров А.В.
1,2
1 Институт микробиологии им. С.H. Виноградского ФИЦ Биотехнологии РАН, 
Москва, Россия 
2 Биологический факультет, Московский государственный университет
им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия 
3 ФНКЦ Физико-химической медицины ФМБА РФ, Москва, Россия 
4 РНИМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия
Введение
Одним из факторов вирулентности 
Staphylococcus aureus
является стафилоксантин 
– золотистый пигмент, биосинтез которого кодируется кластером из 5 генов. Кроме 
этого существует множество факторов, влияющих на количество вырабатываемого 
стафилоксантина, таких как SigB, IspA, CitZ, CitB, CcpE, и AirR некоторые из которых
также связывают с вирулентностью S. aureus.
Материалы и методы
Мы получили стабильно перевиваемые (псевдолизогенные) ассоциации вирулент- 
ного Twort-подобного фага A515 для двух клинических изолятов 
S. aureus
– #402 и 
#515 (РА402 и РА515 соответственно). Ассоциации получены путем переноса матери- 
ала из фаговых бляшек на новую чашку с LB. Эти ассоциации провели через 22 пас- 
сажа (поколения). Для каждой пары фаг-хозяин проанализировали 16 ассоциаций. 
Полученные ассоциации проверяли на содержание бактериофага, способного к росту 
на газоне исходных штаммов-хозяев. Для определения содержания стафилоксантина 
и интермедиатов его синтеза определяли спектры флуоресценции метанольных 
экстрактов биомассы. 
Результаты
К седьмому поколению (пассажу) из 16 ассоциаций РА402 только 5, содержали бакте-
риофаг, способный формировать зоны лизиса на газоне исходного штамма. В после-
дующих поколениях их число не менялось. Оставшиеся 11 ассоциаций также содержали 
дериваты бактериофага A515, но их бляшки можно было наблюдать только на газонах 
некоторых субклонов соответствующих ассоциаций. Ассоциации РА515 вели себя анало-
гично, но в этом случае способность к росту на исходном штамме сохранили фаги в 9 
ассоциациях из 16. 
Мы заметили, что культуры ассоциаций отличаются по цвету от исходного штамма 
и друг от друга. По две ассоциации каждого типа были исследованы на содержание 
стафилоксантинов. В исходных штаммах 402 и 515 синтез пигмента не доводится до 
конца и останавливается на том или ином интермедиате. В одной из исследованных 
культур РА402 стафилоксантин не был найден вообще, а в другой напротив, биосинтез 
доведен до конца. При этом содержание стафилоксантина на одну клетку возрастало 
на 20% с седьмого поколения до одиннадцатого и на 7% с одиннадцатого до восемна-
дцатого, а затем оставалось неизменным. Для ассоциаций РА515, как и в случае РА402, в 
одной из ассоциаций биосинтез был завершен, а в другой стафилоксантин обнаружить 
не удалось. Однако, возрастания количества пигмента в ряду пассажей не наблюдалось.
Заключение
Отбор бактерий в коэволюционирующей системе фаг-хозяин приводит к радиации 
свойств стафилококков в том числе по клинически релевантным признакам, не 
связанным очевидным образом с взаимодействиями с вирусом.

---

Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
190