Сборник содержит материалы научной мультиконференции «Биотех- нология медицине будущего»

Рекомбинантные антистазин-подобные белки медицинской пиявки 
Hirudo medicinalis, полученные в системе экспрессии 
Escherichia coli
Графская Е.Н.
1,2
, Бобровский П.А.
1
, Волков Д.В.
1,3
, Лацис И.А.
1
, Бабенко В.В.
1
, 
Манувера В.А.
1,2
, Лазарев В.Н.
1,2
1
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный научно-клинический 
центр физико-химической медицины Федерального медико-биологического агентства», 
Москва, Россия 
2
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего 
образования «Московский физико-технический институт (национальный
исследовательский университет)», Долгопрудный, Россия 
3
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего 
образования «Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова», 
Москва, Россия
Тромбообразование является жизненно необходимым процессом, однако, нару- 
шение тромбообразования является тяжелой патологией. В клинической практике 
используется ряд модуляторов тромбообразования, обладающих разными свойствами, 
что обуславливается индивидуальными различиям пациентов и особенностями самого
заболевания. Недостаточное или избыточное действие лекарственных средств затруд-
няет их применение для лечения различных тромбозов. Таким образом, поиск соеди-
нений, влияющих на гемостаз, является актуальной социально значимой задачей. 
Источником искомых соединений может выступать медицинская пиявка, секрет 
слюнных желез которой содержит сложную смесь биологически активных веществ, 
обладающих разнообразным спектром действия, в том числе антикоагуляционным [1].
Ранее нами был отсеквенирован геном медицинской пиявки 
Hirudo medicinalis
и 
проведена его аннотация. По результатам биоинформатического анализа черновой 
сборки генома медицинской пиявки были отобраны 14 кандидатных генов, кодирующих 
потенциальные антикоагуляционные агенты. С целью получения выбранных канди-
датных белков и дальнейшего исследования их активности, на основе плазмидных 
векторов были получены конструкции для экпрессии в бактериях 
E. сoli
генов, коди- 
рующих кандидатные белки. Рекомбинатные белки получали как химерные, в качестве 
белка носителя выступал шаперон SlyD. После отщепления целевого белка и хрома-
тографической очистки, активность рекомбинантных белков оценивали с использо-
ванием тестов АЧТВ и тромбинового времени. Среди протестированных белков один 
ингибирует свертывание крови и его активность сопоставима с активностью гирудина, 
известного антикоагулянта пиявки. Получение рекомбинантных высокоактивных 
антикоагуляционных соединений открывает возможность для разработки новых 
эффективных фармакологических соединений.
1. Markwardt F. Hirudin: The Famous Anticoagulant Agent.//Advances in Experimental 
Medicine and Biology. – 1993. – T. 340. – C. 191-211.
Исследование было поддержано грантом РНФ № 17-75-20099.

---

Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
162