Сборник научных трудов

ПРИМЕНЕНИЕ ИММУНОБЛОТИНГОВОЙ ДИАГНОСТИКИ РАЗЛИЧНЫХ БАКТЕРИОЗОВ
(НА ПРИМЕРЕ ХЕЛИКОБАКТЕРИОЗА, МИКОБАКТЕРИОЗА, КЛОСТРИДИОЗА И БРУЦЕЛЛЕЗА) 
Арипова Т.У., Поляруш С.В., Хасанова Л.Н, Саибназаров А.Ш., Рыскулов Ф.Т.,
НасриддиновУ.К., Ташмухамедова М. Р. 
Республиканский научный центр Иммунологии МЗ РУз 
Иммуноблотинговая детекция антигенов ряда возбудителей широко используется за рубежом и характеризу-
ется высокой чувствительность, специфичностью и в ряде случаев имеет важную прогностическую значимость, по-
скольку позволяет проводить дифференцирование антигенов близкородственным организмов и их штаммов. Цель ра-
боты наладить и отработать методы иммуноблотинговой детекции хеликобактериоза, микобактериоза, клостридиоза 
и бруцеллеза среди пациентов различных групп для расширения возможностей клинической иммунодиагностики. Ма-
териал и методы исследования. В период с 2015-май 2018 года обследовано 500 пациентов с нарушением пищеваре-
ния на наличие хеликобактериоза; 40 пациентов на наличие микобактериальной инфекции, в том числе вне легочной 
локализации; 25 детей на наличие токсин-продуцирующих клостридий и 25 пациентов с подозрением на бруцеллез. У 
пациентов было также проведено стандартное обследование, часть пациентов обследована согласно хоздоговору на 
базе клинике «Саховат». Результаты. Согласно полученным данным с помощью иммуноблоттинга были выявлены 
специфические антигены H.pylori в 385 образцах. Чувствительность иммуноблота в среднем составила 40-70 пг анти-
гена на образец, что на порядок выше ИФА метод. Наиболее распространенными антигенами среди локальных штам-
мов H.pylori явились антигены cagA (2,6% случаев), vacA (2,9 % случаев), flaB (35,6% случаев), ureB (58,9 % случаев). 
Следует отметить, что cagA и vacA - антигены характерны для штаммов хеликобактерий I-го генотипа (при затяжном 
течении формируется гастрит с язвенной болезнью желудка с онкоперерождением). В тоже время flaB и ureB- антигены 
характерны для штаммов хеликобактерий II- го генотипа (вызывают гастриты, дуодениты и т.д. и как правило обуслав-
ливают доброкачественное течения инфекции). В отношении микобактериальной инфекции выполнено определение 
антител к микобактериальным антигенам ESAT-6 (6 кДа), MT38 (38 кДа), CFP10 (11кДа)). Определяемые антигены 
были слотированы (блотированы) на нейлоновую мембрану в виде трехступенчатого ряда, в котором каждая ступенька 
соответствовала определенному антигену микобактерий в зависимости от молекулярной массы антигенов. При ана-
лизе полученных образцов от пациентов методом иммуноблотинга положительные результаты дали 97% образцов, 1 
%- дали сомнительный результат и 2% - отрицательный. Однако, профиль антител к изучаемым трём микобактери-
альным антигенам существенно различался среди групп пациентов и обуславливалось рядом факторов. В среднем 
чувствительность иммуноблотинга на микобактериальные антигены составила не менее 97%, а специфичность нахо-
дится в интервале 75-80 %. Так же в исследовании методом иммуноблотинга проводится определение клостридиаль-
ных токсинов и изучается атительный профиль пациентов к различным антигенам при бруцеллезе. Выводы. Исполь-
зование иммуноблотинговой детекции значительно повышает выявляемость ряда бактериозов. Посредством имму-
ноблотинга имеется возможность проводить дифференцированную диагностику генотипов хеликобактерий, форм ми-
кобактериозов и качественно повысить выявление токсин-образующих клостридий, а также распознание бруцеллеза.