С. А. Эгамбердиева молекуляр

Расм. 13.1. ПЗРнинг биринчи раунди. ДНК-нишон бир занжирдаги 1
'-
2 ва 
бошқа занжирдаги – 1-2' кетма-кетликлар билан фланкиризацияланган 
(чегараланган). ДНК намунасига праймерлар (Р1 ва Р2), ДНК-полимераза 
Tag 
ва тўртта дезоксирибонуклеозидтрифосфат (dNTP) қўшилади. 
Аралашма 95°С гача қиздирилади, 1 дақиқа давомида инкубацияланади 
ва 55°С гача аста-секинлик билан совутилади. Ортиғи билан қўшилган 
праймерлар бундай ҳароратда ажратилган занжирлар билан 
жуфтлашади. Ҳарорат 75°С гача оширилади. Бундай шароитларда ДНК 
иккала занжирлари праймерларининг 3'-гидроксил учларидан 
бошланадиган синтези содир бўлади. Синтезланган занжирларнинг ҳар 
бири “унинг” праймерининг 3ʹ-гидроксил гуруҳидан иккинчи праймерга 
комплементар бўлган кетма-кетликнинг охирги нуклеотидигача бўлган 
масофага нисбатан анча катта узунликка эга. Бу занжирлар ПЗРнинг 
иккинчи раундида матрица бўлиб хизмат қилади
. (Глик ва Пастернак 
бўйича) 

---

86 
Иккинчи раундда дастлабки ва янги синтезланган (“узун 
матрица”) занжирлардан ташкил топган икки занжирли ДНК яна 
денатурацияга дучор қилинади, кейин эса праймерлар билан 
тикланади (отжиг қилинади). Синтез вақтида мазкур раундда “узун 
матрицалар”, шунингдек бир учида праймер ва бошқа учида иккинчи 
праймерга комплементар кетма-кетлик бўлган («қисқа матрицалар») 
баъзи бир занжирлар қайтадан синтезланади (расм. 13.2).
Расм. 13.2. ПЗРнинг 
иккинчи раунди. Бу ҳолатда 
биринчи раундда ҳосил 
бўлган ДНК молекуласи 
аралашмаси дастлабки 
материал бўлиб хизмат 
қилади (расм. 5.18). Отжиг 
қилинганда (тикланганда)