Режа Ферментларнинг кашф қилиниши. Хужайра ичи ва ташки ферментлари, ишлатилиш соҳалари Фермент ишлаб чиқаришдаги асосий жараёнлар

Куп ишлатиладиган хужайра ташкариси ферментлари.

• 
  Пепсин
  
• 
  Трипсин
  
• 
  Протеаза
  
• 
  Амилаза
  
• 
  Целлюлаза
  
• 
  Липаза
  
• 
  нуклеаза
  

Ҳужайра ичидаги ферментларни экстракция қилиб, ажратиб олиш бироз мураккаброқ бўлишига қарамасдан, ажратиб олинади, тиббиётда ва озиқ-овқат саноатида ишлатилади.

• 
  глюкозани аниқлаш учун кенг ишлатиладиган -глюкозооксидаза
  
• 
  ҳар хил шишларни даволашда ишлатиладиган аспарагиназа
  
• 
  антибиотикларни трансформациясида иштирок этувчи – пенициллинацилаза
  
• 
  турли максадларда кулланиладиган- эндонуклеазалар, протеазалар, полимеразалар
  

Ҳужайра ичи ферментлари



3.Фермент ишлаб чиқаришдаги асосий жараёнлар.
Ҳужайра ичи ва ҳужайра ташқариси ферментларини ажратиб олиш ва уларни тозалашни дастлабки босқичида жуда ҳам катта фарқ бор.

• 
  Биомассани культурал суюқликдаги метаболитлардан, ҳужайра ташқарисига чиққан ферментлардан ажратиш жараёни центрафуга, сепаратор, оддий фильтрлаш (замбуруғлар учун) орқали амалга оширилади.
  
• 
  Кимёвий таркиби бўйича хилма-хил метаболитлар сақловчи культурал суюқликни фильтрати биомассадан ажратиб олинади.
  
• 
  Фильтрат ажратиладиган ферментни 80%га яқинроқ бўлган фаоллигини сақлайди ва кейинги технологик манипуляцияларга тайёр эритма ҳисобланади.
  
• 
  Ҳужайра ичи ферментларини ажратиб олиш учун биомасса, унда сорбция бўлиб қолган компонентлардан тозалаш учун дистилланган сув ёки жуда ҳам суюлтирилган буфер билан бир неча маротаба ювиб ташланади.
  
• 
  Ҳужайра структурасини бузиб, ичидаги ферментларни ажратиб олиш учун ҳар хил усуллардан фойдаланилади: механик (шарикчалар ёрдамида бузиш; кварц қумлари билан артиш), физик (ультратовуш, гидравлик қимирлатиш, музлатиб-эритиш) ва бошқалар.
  
• 
  Бузилган биомассадан ферментни рН кўрсаткичи ферментга тўғри келадиган суюлтирилган буфер ёрдамида амалга оширилади.
  
• 
  Ҳужайрани бузилган қисмлари центрафуга ёрдамида ажратилади.
  
• 
  Нуклеин кислоталар ферментлар ёрдамида парчаланади ёки юқори молекулали катионлар ёрдамида чўктирилади.
  

Культурал суюқликни фильтрати (ҳужайрадан ташқаридаги ферментлар ажратиш учун) ва ҳужайра ичидаги ферментлар экстракти бир-биридан нима билан фарқ қилади?

• 
  Ҳужайра ташқарисидаги фильтрат одатда 15-20 та ҳар хил оқсиллар сақлайди, ҳужайра экстрактида эса оқсил спектри анча кўпроқ бўлади.
  
• 
  Кўпинча, тиниқ ҳолатдаги фермент эритмаси вакуумда парлатиш орқали ёки ультрафильтрация йўли билан қуюлтириб олинади. Бу усуллар фермент эритмасини 5-15 маротаба қуюлтириб олиш имконини яратади.
  
• 
  Қуюлтирилган фермент эритмалари асбест ёки целлюлоза фильтрларидан ўтказилиб, тозалаб олинади.
  
• 
  Коммерция учун тайёрланган фермент концентратларига стабилизаторлар (ош тузи, бензоатлар, сорбинатлар, баъзида металл ионлари) солинади.
  
• 
  Агар зарур бўлса суюлтирилади.