Amaliy enzimologiya

FAOLLASHTIRILGAN 4B SEFAROZANI TAYYORLASH 
Quyida tavsiflangan amalni ehtiyotkorlik bilan moʼrili shkaf ostida tortish 
paytida 
bajarish 
kerak. 
pH-metr 
va 
pH-elektrod 
yordamida 
Sefaroza 
suspenziyasining pH qiymati 3 M NaOH qoʼshib 11,2 ga yetkaziladi.
Boʼsh kolba taroziga qo’yiladi va tortiladi; keyin u unga 0,67 g quruq CNBr 
solinadi, bromtsainni oz miqdordagi suv qoʼshib eritiladi va kolbani tiqin bilan 
mahkam yopib chayqatib turiladi.

---

Mexanik (KPG) aralashtirgich yoki parrakli aralashtirgich, (lekin magnitli 
bilan emas) bromtsian eritmasi asta-sekin gel suspenziyasiga qoʼshib, pH qiymatini 
doimiy kuzatib boriladi, u (3 M NaOH bilan keltiriladi) 11.2 darajasida qolishi 
kerak. Agar pH oʼzgarishni toʼxtasa va taxminan 6 daqiqa davomida doimiy 
darajada tursa, gelni masalan, Byuxner voronkasida moʼl miqdordagi suv bilan 
yuviladi. 
Oqsilarni bogʼlash 
Sefaroza (20 ml) bilan faollashtirilgan suspenziyasi yuviladi va oʼshancha 
hajmdagi tarkibida 0,5 M NaCl saqlaydigan 0,1 M NaHCO3 (pH 8,2) boʼlgan 
eritma bilan bogʼlanadi, soʼngra 0,2 g oqsil qoʼshiladi. Suspenziyani xona 
haroratida yoki tun boʼyi 4 ° C da, taxminan 3 soat davomida sekinlik bilan 
aralashtiriladi. Supernatantdagi erkin oqil miqdorini bogʼlangan oqsil miqdorini 
hisoblash uchun aniqlanadi. Qolgan reaktsiyaga kirishmagan erkin guruhlarni 5 ml 
1 M glitsin qoʼshib bloklanadi (nofaollashtiriladi). 
Gel avval 0,1 M natriy atsetat / sirka kislotasi ( pH 4,0), soʼngra 0,1 M kaliy 
fosfat (pH 7,6) bilan yuviladi. Gelni saqlash uchun oxirgi kontsentratsiyasi 0,1 M 
natriy azidi (NaN3) solinadi 
 
6-MAVZU: FERMENTLARNING O'ZIGA XOSLIGI MAVZUSI 
Fermentlar katalizli reaktsiyalar turiga va ular faoliyat yuritadigan substratlarga 
nisbatan o'ziga xosdir. Shunday qilib, so’lak amilazasi faqat oqsillarga ta'sir 
qilmasdan polisaxaridlarning gidrolizini tezlashtiradi. Shirdon fermenti sut 
kazeiniga ta'sir qiladi, lekin polisaxaridlarga ta'sir qilmaydi va hokazo.