2.3. Mitoxondriya ichki membranasi o`tkazuvchanligining o`zgarishini aniqlash
Mitoxondriyalarning shishish kinetikasi (1 mg oqsil/ml SI) aniqlash 28 0S
haroratda 540 nm to`lqin uzunlikda 3 ml hajmli kyuvetadagi mitoxondriya
suspenziyasining optik zichligining o`zgarishiga asoslanadi [Brierley, 1974].
Energiyalangan mitoxondriyalar uchun inkubasiya muhiti tarkibi quyidagicha: 125
mM KСl, 10 mM tris-HCl, 2,5 mM KН
2
РO
4
, 1mM EGTA, 5 mM glutamat, 1 mM mаlаt,
рН 7,4; energiyalanmagan mitoxondriyalar uchun esa - 0,24 M sаxаrozа, 10 mM
tris-HCl, 1mM EGTA, 1 mkM rotеnon, рН 7,4 [Azzone, Azzi, 1965; Davidson,
Halestrap, 1990]. Muhit tarkibidagi kalsiy konsentrasiyasini aniqlash uchun Сa
2+
-
EGTA buferidan foydalanildi.
Do'stlaringiz bilan baham: |