Protoplastlarni olish. Reja: Protoplastlarni olish va kultura holatida o‘stirish

almashinuvini tormozlaydi. Osmotik stabilizatorlar sifatida qandlar (glyukoza, 
mannit, sorbit, ksiloza), ion tavsifidagi osmotiklar (CaCl
2
, KCl) 0,3 – 0,8 mol/litr 
konsentratsiyada foydalaniladi. Knsentratsiya har bir o‘simlik ob’ekti uchun yakka 
tartibda tanlab olinadi.
Bunda 15
o 
burchak ostida ushlab turilgan Petri chashkasida to‘qimani fermentlar 
bilan ishlov berish qulayroq hisoblanadi. Protoplastlarning fermentlar bilan 
aralashmasi sentrifuga probirkasiga o‘tkaziladi. Fermentativ aralashmadan 
protoplastlarni ajratib olish ikkita usulda amalga oshirilishi mumkin: sentrifugalash 
bilan 
filtrlash
 yoki 
flotatsiya usulida
 bajarilishi mumkin. Filtrlashda aralashma 
tirqishlari o‘lchami 40 
mkm
 (mikrometr) ni tashkil qiluvchi filtrlar orqali o‘tkaziladi. 
Bunda filtrda hujayralarning yig‘ilgan holatdagi yirik qoldiqlari qoladi. Navbatdagi 
bosqichda sentrifugalash davomida protoplastlar cho‘kadi, hujayra qoldiqlari 
supernatantda qoladi. Takroriy ravishda sentrifugalashda fermentlarning yuvilishi 
amalga oshadi, keyin esa protoplastlar kultura holida o‘stirish muhitiga o‘tkaziladi.

---

---

Protoplastlar kulturasini 
o‘stirish usullari
Protoplastlar kulturasini o‘stirishning ikkita usuli mavjud hisoblanadi. 
Birinchi holatda protoplastlar suspenziyasi tomchi ko‘rinishida plastik Petri 
chashkalariga joylashtiriladi. Bu usulning variantlari 1978 – yilda Yu.Glebov 
tomonidan tavsiya qilingan, 1 mkl (mikrolitr) hajmdagi mikrotomchilar ko‘rinishida