|
РНК ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (RNАi) ТЕХНОЛОГИЯСИ ЁРДАМИДА ҒЎЗА
КРИПТОХРОМ ГЕНЛАРИНИ (
CRY1
ва
CRY2
) ТАВФСИФЛАШ
Усмонов Д.Э., Аюбов М.С., Абдурахмонова М.Ю.,
Норов Т.М., Мирзахмедов
М.Х.,
Ахмедов М.С., Ризаев Д.М., Бўриев З.Т., Абдураҳмонов И.Ю.
ЎзР ФА Геномика ва биоинформатика маркази
111215, Ўзбекистон Республикаси, Тошкент вил., Қибрай тум., Университет кўча, 2-уй
info@genomics.uz
Ўсимликлар оламида фоторепсепторларнинг икки тури маълум бўлиб,
булар: фотосинтез учун ёруғликдан энергия ҳосил қилувчи фотосинтетик
Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
83
пигментлар ҳамда ёруғлик нурига жавоб берувчи фотосинтетик бўлмаган
нурни сезувчи ресепторлар. Ўсимликларда ёруғликни сесувчи ресепторлар
модел организм ҳисобланувчи
Arabidopsis thaliana
ўсимлигида яхши
ўрганилган бўлиб, унинг геномида камида ўнлаб ёруғликка жавоб берувчи
оқсил кодлайдиган фоторесептор генлари мавжудлиги аниқланган (Kolmos E
va Davis S.J. 2007). Ўсимликларда тарқалган ёруғлик сезувчи механизмлар
жуда
мураккаб
бўлиб
фотосинтез,
фотоморфогенез,
гуллашнинг
фотопериодик назорати, фототропизм, даврий соат билан мураккаб
боғланган асосий жараёнларни ўз ичига олади. Бундай физологик ва
биокимёвий жараёнлар асосан қуёш нурида мавжуд бўлган кўк нурларга
жавоб берувчи криптохром генлари оиласи вакиллари томонидан амалга
оширилади. Криптохром генлари оиласи учта катта синфга бўлинади. Булар
ўсимлик криптохромлари, ҳайвон криптохромлари ва криптохром-DASh
оқсилларидир (Chentao Lin. 2005). 1980 йилда
Arabidopsis thaliana
ўсимлигида кўк нурга жавоб берувчи Hy4 гени кашф қилинди ва бу ген 1993
йилга келиб секвенс қилингандан сўнг организмларда кўк нур
фоторепсептори ҳисобланган криптохромлар ўсимликларда, ҳайвонларда,
бактерияларда ва инсонларда аниқланган (Sung Ki va bosh. 2014.,
Cashmore.
A. R. 2003). Ўсимликларнинг криптохром генларининг функцияси
Arabidopsis thaliana
ўсимлигида яхши ўрганилган. Аҳмад ва Кашморе
томонидан биринчи маротаба 1993 йил
Arabidopsis thaliana
ўсимлигидан
Cry1 гени ажратиб олинган (Ahmad M., Cashmore A.R. 1993). 1996 йилга
келиб Лин
Cry1
ва
Cry1
-
DASh
генларини тавфсифланган (Lin CT. 1996).
Криптохром оқсиллари ёруғлик воситасида даврий соат, тропик ўсиш,
гултожибаргларининг очилиши, илдизнинг ривожланиши, бактерия ва
вирусли патогенларга, абиотик стрессларга жавоб қайтаришда, ҳужайра
цикли, ҳужайра ўлимини тартибга солишда, учки апикал қисмларини, мева
ва тухум ҳужайрани ривожланишини, уруғнинг тиним даври, поя узайиши,
барг кенгайиши, фотопериодик гуллаш каби ўсимликларга хос
фотоморфогеник ва фотопериодик белгиларни назорат қилишда иштирок
Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
84
этиши аниқланган (Xuhong Yu 2010., Chentao Lin ва Dror Shalitin 2003., Nancy
A Eckardt. 2003). Шунинг билан бир қаторда криптохромлар ультра бинафша
нурларини ютиши натижасида ўсимлик ривожланишидаги ниҳолларда поя
узайишини сусайтиради, барг оғизчаларини очилиши ва ёпилишида иштирок
этувчи COP1 (Constitutive photomorphogenic 1) оқсилига эпистатик таъсир
кўрсатади. Шуни хисобга олган холда ғўза геномида криптохром гени РНК
интерференция усулида “нокаут” қилиш мақсадида қотор ишлар олиб
бордик.
In silico
ПЗР ёрдамида ғўза криптохром гени
G.raimondi
ғўза геномидан
амплификацияланди. Криптохром генлари (
Cry1
,
Cry2
)
Arabidopsis thalianada
ўсимлигида яхши ўрганилганлиги сабабли генлар маълумотлар баъзасида
(http://www.ncbi.nlm.nih.gov) мавжуд
Arabidopsis thaliana
криптохром (
Cry1
,
Cry2
) генлари ғўза
Cry1
ва
Cry2
генлари билан солиштирилганда 98%
ўхшашлиги маълум бўлди. Шу маълумотлар асосида ғўза
Cry1 ва
Cry2
генига
праймер жуфтлари дизайн қилинди ва улар асосида ғўза геномидан
Cry1
ва
Cry2
амплификация қилиб олинди ва вектор конструкция тузилди.
Ғўза
Cry1
гени фаолиятини РНК-интерференция технологияси орқали
нокаут қилиш натижасида фотодаврий гуллаши тезлашган, транспирация
жараёнини секинлашган, эртапишарлик ва циклик соатларга сезгирлик
ривожланишга эга бўлган янги тизмалар олиш кутилмоқда.
Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
85
Do'stlaringiz bilan baham: |
