44
1- jadval
Yuqori muhit haroratini jigar mitoxondriyalarida glutamat va suksinatni
oksidlanishiga ta’siri (M ± m; n = 6-8)
Ko’rsat-
gichlar
Kalamushlarni saqlash harorati,
0C
Nazorat
41-42
0
C
Nazorat
41-42
0
C
Nafas olish tezligi, nanogramm atom kislorod/daqiqa mg oqsil
α-ketoglutarat
%
Suksinat
%
V
2
25,4±2,3
35,8±3,3
****
140,9
32,6±3,0
48,4±4,2
****
148,5
V
3
105,4±4,8
121,7±6,5
**
115,5
138,9±6,0
153,7±6,9
110,7
V
4
33,2±2,9
50,5±4,1
****
152,3
43,8±3,8
64,1±4,5
****
146,5
NK
CH
3,16±0,09 2,41±0,09
****
76,2
3,14±0,10 2,40±0,06
****
76,4
ADF/O
2,56±0,06
2,26±0,08
*
88,2
1,86±0,07
1,41±0,05
**
85,6
V
DNF
120,5±4,6 180,1±9,9
****
149,5
172,5±6,8
234,4±8,9
*
135,9
Bu holatni mitoxondriya ATF hosil qilib bo’lgandan keyingi dam olish holati deb
ataladi. Demak, mitoxondriyaning nafas olishi ADF qo’shilganda qancha yuqori
bo’lsa, o’shancha ko’p ATF sintezlanadi. Nafas koeffitsienti (NK
Ch
- V
3
/V
4
) Chans
[Shance B, Williams G.R., 1955] uslubi bilan aniqlandi va u 3,16±0,09 tashkil
qildi. Undan tashqari, mitoxondriyaning ATFni sintezlash faoliyatini baholashda
ADF/O (R/O) koeffitsientidan ham foydalaniladi. Bunda mitoxondriyaga
qo’shilgan ADF ning barchasi to’la ATF sintezlangan paytida sarflangan
kislorodning miqdoriga nisbatan o’lchanadi. Bizda bu koeffitsient 2,56±0,06 molni
tashkil qildi. Bu nisbat qancha katta bo’lsa mitoxondriyaning energiya ishlab
chiqarishi o’shanchalik yuqori bo’ladi. Nazariya bo’yicha mitoxondriyada α-
ketoglutaratni oksidlanishda 3 mol ATF hosil bo’ladi [Shance B, Williams G.R.,
1955;
Almatov
K.T.,1990].
Amalda,
yaxshi
holatda
ajratib
olingan
mitoxondriyalarda ADF/O suksinat oksidlanishida 3 mol ga yaqin ATF hosil
bo’ladi. Demak, jigar to’qimasidan biz ajratib olgan mitoxondriyalarimizda
glutamatni
oksidlanishi
va
oksidlanishli
fosforlanishi
adabiyotlardagi
ma’lumotlarga to’g’ri keladi.
Yacheykaga oksidlanishni fosforlanishdan ayiruvchi 2.4-dinitrofenol (DNF)
qo’shilsa mitoxondriyaning α-ketoglutaratni oksidlanishi tezlashib ketadi va
yacheykaga qo’shilgan kislorod tugaguncha davom etadi va bizda bu ko’rsatkich
120,5±4,6 nanogramm atom O
2
/min mg oqsil. Buni erkin oksidlanish deb ataladi.
45
Dinitrofenol ta’siridagi oksidlanish tezligi V
2
va V
4
holatdagi oksidlanishdan
qancha tez bo’lsa, demak, mitoxondriyalar intakt holatda ajratilganini, ya’ni ATF
sintezi me’yorda ekanligini bildiradi.
Hayvonlarni 41-42
0
C haroratda saqlanganda jigar mitoxondriyalarining
nafas olishi termoneytral haroratdagi ko’rsatkichlarga nisbatan yanada
kuchayganligi, ammo fosforlanishli oksidlanishida esa birozgina pasayishi
aniqlandi. Mitoxondriyalarda V
2
; V
3
va V
4
holatlarda α-ketoglutaratni oksidlanishi
termoneytral holatdagi ko’rsatkichlarga nisbatan 1,30; 1,35 va 1,61 martalarga
martalarga oshsa. Bunda Chans bo’yicha nafas ko’rsatkichi va ADF/O koefitsenti
7,3 va 11,8 % larga kamaydi. Demak, haroratni ko’tarilishi, jigar hujayralarida
substratlardan elektronlarni mitoxondriyalarning nafas olish zanjiri bo’ylab
molekulyar kislorodga uzatilishi yanada tezlashadi. Bu o’z navbatida
mitoxondriyalarda ATF sintezini kuchayganligidan dalolat beradi. Chunki
oksidlanishni Chans bo’yicha nafas ko’rsatkichi va ADF/O koeffitsentlarini
kamaygani bilan, mitoxondriyaning fosforlanishli oksidlanish holatdagi nafas
olishi kuchaygan.
Mitoxondriyaga suksinatni qo’shgandan keyin mitoxondriya nafas ola
boshlaydi (V
2
holat), ya’ni mitoxondriya o’lchash muhitidagi kislorodni iste’mol
qila boshlaydi (30,0±3,0 nanogramm atom O
2
/min mg oqsilni tashkil qildi),
oradan 30-40 soniya o’tgach yacheykaga 200 mkM ADF solindi, birdaniga
mitoxondriyaning nafas olishi keskin tezlashdi (V
3
holat - 138,9±6,0 nanogramm
atom O
2
/min mg oqsilni tashkil qildi). Bu mitoxondriyaga qo’shilgan ADF
o’lchash muhitidagi F
n
bilan qo’shilib ATF hosil bo’lganligini bildiradi va buni
oksidlanishli fosforlanishli holat deb ataladi. Qo’shilgan ADF ning hammasi ATF
ga aylanishi bilan nafas olishi keskin sekinlashdi, ya’ni tinchlik (V
4
) holatga o’tadi
(34,1±3,8 nanogramm atom O
2
/min mg oqsilni tashkil qildi). Bu holatni
mitoxondriya ATF hosil qilib bo’lgandan keyingi dam olish holati deb ataladi.
Demak, mitoxondriyaning nafas olishi ADF qo’shilganda qancha yuqori bo’lsa,
o’shancha ko’p ATF sintezlanadi. Nafas koeffitsienti (NK
Ch
- V
3
/V
4
) Chans
[Shance B, Williams G.R., 1955] uslubi bilan aniqlandi va u 3,10±0,10 tashkil
46
qildi. Undan tashqari, mitoxondriyaning ATFni sintezlash faoliyatini baholashda
ADF/O koeffitsientidan ham foydalaniladi. Bunda mitoxondriyaga qo’shilgan
ADF ning barchasi to’la ATF sintezlangan paytida sarflangan kislorodning
miqdoriga nisbatan o’lchanadi. Bizda bu koeffitsient 1,81±0,07 molni tashkil qildi.
Bu nisbat qancha katta bo’lsa mitoxondriyaning energiya ishlab chiqarishi
o’shanchalik yuqori bo’ladi. Nazariya bo’yicha mitoxondriyada suksinatni
oksidlanishda 2 mol ATF hosil bo’ladi [Shance B, Williams G.R., 1955; Almatov
K.T., 1990]. Amalda, yaxshi holatda ajratib olingan mitoxondriyalarda ADF/O
suksinat oksidlanishida 2 mol ga yaqin ATF hosil bo’ladi. Demak, jigar
to’qimasidan biz ajratib olgan mitoxondriyalarimizda suksinatni oksidlanishi va
oksidlanishli fosforlanishi adabiyotlardagi ma’lumotlarga to’g’ri keladi.
Yacheykaga oksidlanishni fosforlanishdan ayiruvchi 2.4-dinitrofenol (V
DNF
)
qo’shilsa mitoxondriyaning nafas olishi keskin tezlashib ketadi va yacheykaga
qo’shilgan kislorod tugaguncha davom etadi va bizda bu ko’rsatkich 142,5±6,8
nanogramm atom O
2
/min mg oqsilni tashkil qildi.
Hayvonlarni 41-42
0C
haroratda saqlanganda jigar mitoxondriyalarida V
2
, V
3
va V
4
holatlarda suksinatni oksidlanishi termoneytral holatdagi ko’rsatkichlarga
nisbatan 1,39; 1,20 va 1,60 martalarga oshdi. Ammo, Chans bo’yicha nafas
ko’rsatkichi va ADF/O koefitsenti o’zgarmadi. Demak, haroratni ko’tarilishi, jigar
hujayralarida substratlardan elektronlarni mitoxondriyalarning nafas olish zanjiri
bo’ylab molekulyar kislorodga uzatilishi yanada tezlashadi, ya’ni ATF sintezi
kuchayganligidan dalolat beradi.
Bu fikrimizni to’g’riligini α-ketoglutarat va suksinatni oksidlanishida
dinitrofenol qo’shilganda olgan natijamiz ham tasdiqladi.
Yuqori muhit haroratida suksinatni dinitrofenol qo’shilgandagi oksidlanishi
234,4±8,9 nanogramm atom O
2
/min mg oqsilni tashkil qilgan bo’lsa, α-
ketoglutaratni oksidlanishi 180,1±9,9 nanogramm atom O
2
/min mg oqsilni tashkil
qildi, ya’ni termoneytral haroratdagi ko’rsatkichga nisbatan 1,36 va 1,49
marotabalarga oshdi.
47
Demak, kalamushlarni 60 daqiqa davomida 41-42
0C
haroratda saqlanganda
jigar mitoxondriyalarining nafas olishi V
2
va V
4
holatlarda termoneytral
haroratdagi ko’rsatkichlarga nisbatan sezilarli darajada oshadi, natijada Chans
bo’yicha nafas ko’rsatigichi va ADF/O koeffitsienti pasayadi. Demak, tashqi
muhitning yuqori harorati jigar mitoxondriyalarida ATF sintezini pasaytiradi, erkin
oksidlanishni, ya’ni issiqlik ajralib chiqishini kuchaytiradi.
Do'stlaringiz bilan baham: |