Muhandislik qilingan oqsil-oqsil kompleksining strukturasini aniqlash va termodinamik stabilizatsiyasi

ZSPA-1 (II, III) affikorining biofizik tavsifi
kontsentratsiyasi bilan mustaqil elutsiya hajmi gelfiltrasyonda bu oqsil qiladi, deb ko'rsatadi
biroz kattaroq hajmni eritilgan globula xususiyati tufayli kattaroq gidrodinamik nisbat yoki tez buklanish-
ochilish muvozanati bilan izohlash mumkin. Keyinchalik barqarorlik va 15N
(III). 15N - HSQC spektri F32Q/W35K uchun yaxshilangan (ma'lumotlar ko'rsatilmagan), W35K esa
agregat emas (8.1b-rasm). Saqlash hajmi Z-domeniga va harakatsizga yaqinlashadi
bularning vaqtinchalik ochilishiga olib keladi (III). Buklanganlarga nisbatan past erkin energiya farqi
F32Q mutatsiyasi bepul ZSPA-1 xarakteriga ijobiy hissa qo'shadi . Simmetrik tepalik
F32Q. Biroq, hech kim agregatsiya belgilarini ko'rsatmaydi (8.1b-rasm) va ANS ta'siri kamayadi.
ochilgan davlat, shuningdek, ochilgan davlat aholisining ko'payishiga olib keladi.
ZSPA-1 ning NMR xarakteristikasi ushbu mintaqadagi dinamikani ko'rsatdi.
W35K va F32Q/W35K mutantlari uchun tuzilmaviy yaxshilanishlar nisbatan kichikroq.
Kutilganidek, Z domeniga yaqinlik, chunki triptofan qoldig'i katta rol o'ynaydi.
nuqta mutatsiyalari F32Q, W35K va ikki tomonlama mutant F32Q/W35K tanlangan, chunki
Z ga bog'lanib, yaqinlikni 10 (III) marta pasaytiradi.
domen, buning o'rniga hidrofobik sirtni oshiradi, bu esa noqulay bo'lishi mumkin. The
katlama jarayoni to'liq kooperativ emas. Biroq, F32Q mutatsiyasi salbiy ta'sir ko'rsatadi
kompleksni tahlil qilish. Valin qoldig'i Z ning bog'lanishiga hissa qo'shmaydi
Denaturatsiya profili shuni ko'rsatadiki, ko'proq tuzilgan protein bilan mos keladi
44
ularning yovvoyi turi ketma-ketligiga qaytdi. Val-11 strukturaviy asosda Asn ga o'zgartirildi
HSQC spektri ma'lum darajada yaxshilanadi (8.3c-rasm) va ANS bilan bog'lanishi kamayadi (III). Bu
tuzilmagan ko'rinish (8.5d-rasm). W35K mutatsiyasi bog'lanishni butunlay bekor qiladi
ulanish interfeysi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan).
Bir nechta bitta aminokislota almashinuvining ta'sirini tahlil qilish uchun to'rtta pozitsiya tanlangan va
8.3 To'rtta ZSPA-1 mutantlarining xarakteristikasi
Machine Translated by Google

---