Mavzu : Restriksiya usullari

Mavzu : Restriksiya usullari
Cheklov fermentlari polimerazalarning qarama-qarshi vazifasini bajaradi, chunki ular nukleotid zanjiridagi qo'shni nukleotidlar orasidagi fosfodiester bog'lanishidagi ester bog'lanishini gidrolizlaydi yoki uzadi.
Molekulyar biologiya va genetik muhandislikda ular ekspression va klonlash vektorlarini tuzishda, shuningdek o'ziga xos ketma-ketlikni aniqlashda keng qo'llaniladi. Ular shuningdek rekombinant genomlarni yaratish uchun foydalidir va katta biotexnologik salohiyatga ega.
Gen terapiyasining so'nggi yutuqlari ma'lum genlarni vektorlarga kiritish uchun cheklovchi fermentlardan foydalanmoqda, ular bu kabi genlarni tirik hujayralarga ko'chirish vositasi va, ehtimol, bajarish uchun hujayra genomiga kiritish qobiliyatiga ega. doimiy o'zgarishlar.
Molekulyar biologiya va genetik muhandislikda ular ekspression va klonlash vektorlarini tuzishda, shuningdek o'ziga xos ketma-ketlikni aniqlashda keng qo'llaniladi. Ular shuningdek rekombinant genomlarni yaratish uchun foydalidir va katta biotexnologik salohiyatga ega.
Gen terapiyasining so'nggi yutuqlari ma'lum genlarni vektorlarga kiritish uchun cheklovchi fermentlardan foydalanmoqda, ular bu kabi genlarni tirik hujayralarga ko'chirish vositasi va, ehtimol, bajarish uchun hujayra genomiga kiritish qobiliyatiga ega. doimiy o'zgarishlar.
Ta'sir mexanizmi
Cheklov fermentlari DNKning ikki guruhli bo'linishini katalizatsiyalashi mumkin, ammo ba'zilari bir qatorli DNK ketma-ketliklarini va hatto RNKni tanib olishga qodir. Kesish ketma-ketlikni tanib bo'lgandan keyin sodir bo'ladi.
Ta'sir mexanizmi har bir DNK zanjirining orqa miya qismidagi fosfat guruhi va dezoksiriboza o'rtasidagi fosfodiester bog'lanishining gidrolizidan iborat. Ko'pgina fermentlar tanib olgan joyida, boshqalari esa undan oldin yoki keyin 5 dan 9 tagacha juftlarni kesishadi.
Odatda bu fermentlar fosfat guruhining 5 'uchida kesilib, 5' fosforil uchi va 3 'terminali gidroksil uchi bo'lgan DNK parchalarini hosil qiladi.
Oqsillar DNKdagi tanib olish joyi bilan to'g'ridan-to'g'ri aloqa qilmagani uchun, ular ma'lum bir joyga erishilgunga qadar ketma-ket ko'chirilishi kerak, ehtimol DNK zanjiridagi "siljish" mexanizmlari yordamida.
Fermentatik parchalanish paytida DNK zanjirlarining har birining fosfodiester aloqasi restriktiv fermentlarning faol joylaridan biriga joylashadi. Ferment tanib olish va bo'linish joyidan chiqib ketganda, uni o'ziga xos bo'lmagan vaqtinchalik assotsiatsiyalar orqali amalga oshiradi.

Turlari
Hozirgi vaqtda restriktiv fermentlarning beshta turi ma'lum. Har birining qisqacha tavsifi: