Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Последователность выполненияпроточной цитометрии.
Принцип выполнение этого метода очень прост. Исследуемая суспензия клетки перерабатывается моноклональными антителами и располагается в поток дисперсной среды, то есть переводяший поток ячейки.
С помощью определенных волн лучей можно получить анализ параметров нескольких клеток в результате возбуждения молекул.
При использование проточной цитометрии специфическая дисперсионная среда(моноклоналные антитела) отмечается со специальными флюоресцирующими красками – флюрохромами.
Самымлучшим в проточной цитометриифлуорохромом считается йодистый пропидий, его спектральная характеристика считается идеальным для проведения проточной цитометрии.
Преимущество ТЦ:

• 
  Быстрота скорости получения результата
  
• 
  Имеет возможность определитьбольшое количество клеток.
  
• 
  Можно определить субпопуляции одной клетки
  
• 
  Определяет параметры любых структур
  
• 
  Самая высокая степен объективности.
  

В иммунологии применяется в следующих целях.

• 
  При определении иммунофенотипов клеток крови
  
• 
  При определение фагоцитарной активности иммунных клеток
  
• 
  При идентификации внутриклеточных белков
  
• 
  При изучении пролиферативной активности клеток
  
• 
  При определение цикла клетки
  
• 
  При определении цитотоксической активности
  

На сегодняшний день в иммунологических лабораториях с помощью поточной цитометрии можно определить следующие параметры иммунной системы.
- Состав субпопуляции лимфоцитов в периферической крови
(CD40+CD3+; CD3-CD19+; CD3+CD4+; CD3+CD8+; индекс иммунорегулятора. CD3+CD4+/CD3+CD8+) . Для выявления течения острых и хронических болезней, связанных с иммунной системой, мониторинг терапии.
-Для определения количества СD25 экспрессивных лейкоцитов (CD3+CD25+; CD25+)
- Для определения количества HLA-DR экспрессивных лейкоцитов (CD3+HLA-DR+; CD3-HLA-DR+)
-Определение Т-лимфоцитов CD4+CD8+ «дубль» позитивных Т-лимфоцитов (Т-памяти и др.).
- Выявление провоспалительных (CD14+CD16-) и воспалительных моноцитов (CD14+CD16+)
- При определении параметров активности гранулоцитов (фагоцитоз).
Новый портативный и стабильный аппарат PARTEC дает возможность диагностики за короткий срок.
Точный показатель количества лейкоцитов Соunter, определяет процентное количество СD4+Т-лимфоцитов.



Рисунок 70. CYFLOW® COUNTER проточный портативный аппарат

Рисунок.71 Определение абсолютной концентрации СД4 + Тлимфоцитов крови.

Рисунок 72. Определение количества СД4 + Т лимфоцитов в крови