Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Определение фаговаров бактерий.Фаготипирование используют в случаях назначения лечения бактериофагами для эффективности их применения. Бактериологический анализ выявляет присутствие в организме конкретного вида бактерии, а с помощью фаготипирования по описанной выше технологии определяют, подходит ли выбранный для лечения препарат бактериофага к данному бактериальному штамму, будет ли осуществлен лизис патогенной бактерии.
Стоит добавить, что активность бактериофага зависит от степени его разведения (концентрации фагов в растворе препарата бактериофага), при которой осуществляется полный лизис выбранной чувствительной бактерии. Готовые препараты бактериофагов допустимо разводить, но наилучший эффект лизиса бактерий будет достигнут при употреблении их в той концентрации, которая предложена фармацевтической промышленностью.
С помощью метода фаготипирования стафилококков, применение которого было начато Fisk в 1942 году, можно установить источник и пути распространения инфекции.
Фаготипированию подвергают коагулоположительные штаммы. Международным набором, состоящим из 22 фаготипов, удается типировать около 80% патогенных стафилококков.

Набор типовых стафилококковых фагов разделен на 4 группы:

№ группы	Номера фагов
I	29, 52, 52А, 79, 80
II	ЗА, ЗВ, ЗС, 55, 71
III	6, 7, 42Е, 47, 53, 54, 75, 77, 83А
IV	42Д
Вне групп	81, 187

Перед употреблением фаги разбавляют стерильным щелочным бульоном до рабочего разведения, согласно их паспортным данным. Неразведённые фаги применять не следует, так как они могут содержать фактор, подавляющий в различной степени рост стафилококковой культуры. Эта симуляция лизиса может привести к неправильной оценке результатов типирования.
Определение фаготипа культуры стафилококка
- посев методом газона в питательную среду суточной чистой культуры стафилококка
-немного подсушивается в термостате
-в каждый квадратик вливаем пипеткой опеределенные фаги свойственные 4 группам.
- инкубируем в термостате сутки
-смотрим в каком квадрате происходит лизис
Определение фаготипа стафилококка производим по образовавшемуся лизису
Набор сухих фагов стерильно растворяют в щелочном бульоне (Мартена, Хоттингера или мясопептонном рН — 7,6) с 0,4% глюкозы и 0,02% СаСО. Добавляют 1 мл бульона, получают разведение фага 1 : 10, из которого готовят два рабочих разведения, соответствующие тест разведению (TP), и 100 TP разведение, соответствующее 1 TP, указанному на этикетке фага. Первое рабочее разведение фатов (1 TP) следует готовить заново каждые 7—10 дней.