Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Лабораторная работа.Определение титра бактериофага Т4 методом послойного агара.
Цель: Обучить выделению бактериофага и определению его титра.


Необходимое оборудование:бактериофагТ4, агарная культура E. coli, стерильные флаконы или пробирки - 10шт., 3 мл ые пробирки с полужидким агаром - 10 шт., стерильная дистиллированная вода, спиртовка, резиновая груша, стерильные пипетки 12-15 шт., резиновая перчатка, физиологический раствор. Работа проводится в стерильных условиях.
Шаги выполнения:

№	Выполняемая работа	Схема выполнения	Выполнил полностью и точно (балл)
1	С помощью пипетки в каждую пробирку наливают по 9 мл дистилированной воды и записывют титр разведения на пробирках с 10^-1 до 10^-10		10
2	С помощью пипетки в стерильные пробирки наливают по 3 мл 0,7%ый полужидкого агар и надписывют титр разведения с 10^-1 до 10^-10		10
3	Берут 1 мл суспензии бактериофага с помощью пипетки и добавляют в 10^-1 стерильную воду во флаконе и перемешивают		10
4	С помощью пипетки берут 1 мл смеси бактериофага и воды из первой пробирки и наливают во вторую пробирку и так титруют до 10^10, каждый раз хорошенько перемешивая. При взятии материала из пробирки для каждого разведения используют стерильные пипетки		15
5	Наливают во все флаконы 0,5мл суспензии, проготовленной из агаровой культуры E. сoli (специфичная для Т-4 фага)		15
6	В пробирки с полужидким агаром наливают суспензию из E. сoli и Т-4 фага по 0,2 мл и осторожно перемешивают между ладонями		15
7	Их наливают в плотный агар в чашках Петри, в которых подписаны разведения и медленно вращают чашечки для равномерного распространения полужидкого агара по поверхности плотного агара.		10
8	Посевы ставят в термостат на 18-24 ч, затем изучают результаты. Определяют титр фага Т-4 и записывают в тетрадь.		15
ИТОГО				100