Лаборатория машғулоти. Бактерия хужайрасининг тузилиши ва кимёвий таркиби, уларни аниқлаш

Бактерияларни спораси.
Баъзи бир бактериялар (Clostridium, Bacillus) ноқулай шароитга тушиб қолганда 
эндоспора ҳосил қилади. Спора бактерияларни ўзига хос бўлган тинч турувчи шакли 
ҳисобланади ва уларнинг метаболитик активлиги ўта паст бўлади, лекин улар ташқи 
муҳит омилларига ( қуритишга, юқори температурага, кимёвий моддаларга) ўта 
чидамли бўлади. Ташқи муҳитда бир неча ўн йиллар сақланиши мумкин. Спорани 
ташқи омилларга бунчалик чидамли бўлишини, улар таркибидаги дипиколин 
кислотаси ва кальций тузлари таъминлайди. Бундан ташқари спора таркибида эркин 
сув молекулалари учрамайди, сув фақат боғланган кўринишда бўлади. Спора яхши 
шароитга тушса, ундан яна вегетатив шакли ҳосил бўлади. Бактерияларда спора 
кўпайиш хусусияти эмас, у турни табиатда сақланишини таъминлайди. Бактерияларни 
спорасини аниқлаш амалиётда диагностик аҳамиятга эга. Бактерияларни спорасини 
Ожешко усули билан аниқланади. 
 
Грам усулида бўяш
. Мураккаб бўяш усуллари ёрдамида хужайранинг 
турли структур элементларини аниклаш мумкин. Хужайра деворининг 
тузилишга кура Грам (+) ва Грам (-) микроорганизмлар фарқланади. Хужайра 
девори таркибида мурин (пептидогликан) бўлади. Пептидогликан асосини No-
ацетил глюкозамин ва Nо -ацетил мурам кислота ташкил килади. Бу моддалар таркибида 
Mg ионлари, тейхоев кислота бўлади. 
Грам (+) бактериялар хужайра девори липополисахарид булмайди, лекин оксилли 
тузилмалар булади. 
Грам (+) бактериялар бўялганда: тейхоев кислота Mg ионлари иштирокида генциан 
- бинафша бўёги билан спиртда эримайдиган комплекс хосил килади. 
Кейинчалик фуксин билан бўялганда, иккинчи бўёкни қабул қилмайди, чунки 
олдин биринчи бўёк билан бўялган бўлади. (генциан бинафша бўёги билан). 
Грам (-) бактериялар хужайра девори - юпқа бўлиб, таркибида 20% гача 
пептидогликан сақлайди. (ўртача 10-12%). Пептидокликан таркибида тейховая 
кислота бўлмайди. 
Шунинг учун бу бактериялар генциан - бинафша бўёги билан компекс хосил 
килмайди. Спирт билан бўялганда эса, биринчи бўялган рангини йукотади. Фуксин 
(иккинчи буёқ) таъсир эттирилгандан сўнг, фуксиннинг рангини (кизил рангини) олади. 
Грам усулида бўяш учун фиксацияланган суртма тайёрланади.

---

1.
Генциан бинафша бўёғи билан бўяш (2 минут) 
2.
Люгол йоди эритмаси (1 минут) 
3.
Этил спирти 96º С (30 секунд) 
4.
Сув билан ювиш. 
5.
Фуксиннинг сувли эритмаси (3 минут) 
Тайёрланган суртма қуритилиб микроскоп остида кўрилади. Грам (+) бактериялар 
бинафша, Грам (-) бактериялар қизил рангга бўялади.