Клиник лаборатор диагностика бўйича қЎлланма

 
1.4. Билирубин ва уни аниқлаш 
Пигмент алмашинувини характерловчи асосий кўрсаткич бўлиб 
билирубин ва унинг қон зардобидаги фракциялари ўисобланади. Билирубин 
ва унинг маҳсулотлари – уробилин ва стеркобилин ўт пигментларига киради. 
Ўт пигментлари, асосан, эритроцитлар гемоглобинни парчаланиш жараёнида 
ҳосил бўлади. Қонда умумий билирубин, эркин (нотўғри, коньюгирланмаган) 
ва боғланган (тўғри, коньюгирланган). 
 
УМУМИЙ БИЛИРУБИННИ АНИҚЛАШ УЧУН ДАСТУР ТУЗИШ 
Усул номи 

ёки 

тугмала-
рни босиш билан 
ҳарф танланади.
TBIL 
Реакция тури 

ёки 

тугма-
лари билан 
керакли режим 
танланади 
Охирги нуқта 
Тўпламдаги 
қўлланма 
Ноль 
-«- 
0 сувга қарши 
-«- 
Ўлчов бирлиги 
-«- 
umol/l 
-«- 
Ҳарорат 
-«- 
37

С 
-«- 
Калибровка 
Стандарт бўйича 
-«- 
Стандарт кон-
Клавиатура ёр-
Стандарт фла-

---

24 
центрацияси: 
дамида терилади 
конида кўрса-
тилган. 
Проба ҳажми 
-«- 
30,0 мкл 
Тўпламдаги 
қўлланма 
Реагент 1 ҳажми 
-«- 
500 мкл 
-«- 
Реагент 2 ҳажми 
-«- 
0 
-«- 
Фильтр 1 

ёки 

тугма-
лари билан 
керакли режим 
танланади
546 
-«- 
Фильтр 2 
-«-
- 
-«- 
Меъёр: 
Макс. 
Мин. 
Клавиатура ёр-
дамида терилади 
17.0 
1.0 
-«- 
 Чизиқлилик: 
Макс концентрация 
-«- 
340 
-«- 
 
 
БОҒЛАНГАН БИЛИРУБИННИ АНИҚЛАШ УЧУН ДАСТУР ТУЗИШ 
Усул номи 

ёки 

тугмаларни бо-
сиш билан ҳарф танла-
нади.
DBIL 
Реакция тури 

ёки 

тугмалари би-
лан керакли режим 
танланади 
Охирги нуқта Тўпламдаги 
қўлланма 
Ноль 
-«- 
0 сувга қарши 
-«- 
Ўлчов бирлиги 
-«- 
umol/l 
-«- 
Ҳарорат 
-«- 
37

С 
-«- 
Калибровка 
Стандарт 
бўйича 
-«- 
Стандарт кон-
центрацияси: 
Клавиатура ёрдамида 
терилади 
Стандарт 
флаконида 
кўрсатилган. 
Проба ҳажми 
-«- 
30,0 мкл 
Тўпламдаги 
қўлланма 
Реагент 1 ҳажми 
-«- 
500 мкл 
-«- 
Реагент 2 ҳажми 
-«- 
0 
-«- 
Фильтр 1 

ёки 

тугмалари би-
лан керакли режим 
танланади
546 
-«- 
 Фильтр 2 
-«-
- 
-«- 
Меъёр: 
Макс. 
Мин 
Клавиатура ёрдамида 
терилади 
5.1 
0 
-«- 

---

25 
Чизиқлилик: 
Макс концентра-
ция 
-«- 
340 
-«- 
Умумий ва боғланган билирубинни аниқлаш усуллари
ПРИНЦИП 
Билирубин диметилсульфоксид (DMSO) иштрокида диазотланган
сульфанил кислота билан реакцияга киришади ва азобилирубин 
ҳосил қилади. DMSO иштрок этмаганда реакцияга фақат 
боғланган билирубин киришади. 
РЕА-
ГЕНТЛАР 
Умумий билирубин Боғланган 
билирубин 
R1: Реагент R1: Боғланган 
реагент 
Сульфанил кислотаси 32 ммоль/л Сульфанил к-таси 32 
ммоль/л 
DMSO 
7 ммоль/л Хлорид кислота
165 моль/л 
Хлорид кислота 165 ммоль/л
R2: Натрий нитрит 29 ммоль/л R2: Натрий нитрит 
29 ммоль/л 
ИШЧИ РЕ-
АГЕНТНИ 
ТАЙЁР-
ЛАШ 
Ишлатиш учун тайёр. Ишчи реагентни тайёрлаш учун 9 мл R1 ва
0,3 мл R2 аралаштирилади. Ишчи реагент 2 – 8
о
С да, қоронғида 5 
кун давомида яроқли.
СТАБИЛ-
ЛИГИ 
Реагентлар қадоқда кўрсатилган кунгача яроқли. Хона ҳароратида 
сақлансин.
НАМУНА 
Гемолиз бўлмаган зардоб.
ЎЛЧАШ 
ШАРТЛА-
РИ 
Тўлқин узунлиги 546 нм (530 – 580 нм) 
Ҳарорат хона ҳарорати 
Кювета (опт. йўл узунлиги) 1 см 
Ноль дистилланган сувга қарши 
ҚЎЛДА 
АНИҚЛАШ 
УСУЛИНИНГ 
КЕЧИШИ
А) УМУМИЙ БИЛИРУБИН 
Стандарт 
учун бланк
Стандарт 
Намуна 
учун бланк
Намуна 
R1 +R2 
R1 
Намуна 
Калибра-
тор* 
------- 
0,45 (1,5) мл 
------- 
30 (100) мкл 
0,45 (1,5) 
мл 
------ 
------ 
30 (100) 
мкл 
------- 
0,45 (1,5) мл 
30 (100) мкл 
------- 
0,45 (1,5) 
мл 
------- 
30 (100) 
мкл 
------- 
Аралаштиринг, 10 дақиқа давомида инкубация қилинг кейин 
бланкга қарши оптик зичликни ўлчанг. Ҳосил бўлган ранг 
қоронғида 1 соат давомида стабил.
БОҒЛАНГАН БИЛИРУБИН 

---

26 
Намуна учун 
бланк
Намуна 
R1+ R2 
R1 
Намуна 
------- 
0,45 (1,5) мл 
30 (100) мкл 
0,45 (1,5) мл 
------- 
30 (100) мкл 
Аралаштиринг, роппа – роса 5 дақиқа инкубация қилинг ва 
бланкга қарши оптик зичликни ўлчанг. Қавс ичида стандарт кю-
вета учун намуна ва реагентлар миқдори келтирилган.
ҲИСОБЛАШ: 
(A2 –A1) Намуна 

х Калибратор концентрацияси 
(A2 –A1) Станд. 
ЧИЗИҚЛИ-
ЛИК: 
340 мкмоль/л (20 мг/дл)гача. 
Юқори концентрацияларда намуна физиологик эритма билан су-
юлтирилади. Олинган натижалар суюлтириш коэффициентига 
кўпайтирилади. 
МЕЪЁРИЙ 
КЎРСАТКИЧ 
Умумий Билирубин: до 17,0 мкмоль/л (1,0 мг/дл) 
Боғланган Билирубин: до 5,1 мкмоль/л (0,3 мг/дл) 
 
Билирубинни аниқлашнинг клиник-диагностик аҳамияти: Са-
риқликни пайдо бўлиши қонда билирубиннинг миқдори 27-34 мкмоль/л ва 
ундан юқори бўлганда кузатилади. Гипербилирубинемия сабабалари бўлиши 
мумкин:
1. эритроцитлар кучли гемолизи;
2. жигар ҳужайралар фаолиятининг бузилиши;
3. ўт чиқарилишининг бузилиши.
Биринчи ҳолатда гемолитик сариқлик ҳақида, иккинчида – паренхима-
тоз, учинчисида эса механик сариқлик ҳақида гапирилади.
Гемолитик сариқлиқлар эритроцитларнинг жадал парчаланиши (гемо-
лиз) билан кечиб, натижада эркин билурубин ҳосил бўлиши ошади (Янги 
туғилган чақалоқлар гипербилирубинемияси, аутоиммун гемолитик камқон-
ликлар, нур касаллиги, гуруҳи тўғри келмаган қонни қуйиш, фенилгидразин, 
сульфаниламидлар билан заҳарланишлар).
Паренхиматоз сариқликда гепатоцитларнинг деструктив-дистрофик ва 
строма ҳужайраларида, ўт йўлларида босимнинг ошишига олиб келувчи ин-
фильтратив ўзгаришлари кузатилади. Қонда боғланган билирубин концентра-
циясининг ошиши унинг сийдикда пайдо бўлишига олиб келади. (билируби-
нурии).
Обтурацион сариқлик патогенези асосида (димланган, механик, холе-
статик) ўтнинг ичакка тушишининг тўхташи, бу билан сийдикдан стеркоби-
линогенни йўқолишига олиб келиши ётади. Ўт йўлининг тиқилиб қолиши 
нажаснинг рангсизланишига олиб келади. Механик сариқликларда қондаги 
боғланган билирубиннинг юқори концентрацияси унинг сийдикда пайдо 
бўлишига олиб келади. (билирубинурии).